MAFLD合併原発性胆汁性胆管炎の病態解明と新規治療法の構築

原发性胆汁性胆管炎并发MAFLD的病理阐明及新治疗方法的开发

• 批准号: 22K07981
• 负责人: 川田 一仁
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07981/
• 关键词: 原発性胆汁性胆管炎; 高脂肪食; 肝線維化; 胆汁酸

ヒト様胆汁酸組成マウス(Cyp2c70/Cyp2a12 double knockout mouse)に普通餌(Normal Diet; ND)と高脂肪食(High Fat Diet; HFD)と2オクチン酸(2OA)投与群とPBS(control)投与群の４群(A: ND+PBS, B: ND+2OA, C: HFD+PBS, D: HFD+2OA)を作成した。10Wにsacrificesして、肝臓、胆嚢、血液、小腸、便を採取して、病理組織学的評価や肝内の炎症性サイトカインやケモカインの発現、腸内細菌叢を検討した。病理組織学的評価ではHFD投与群で脂肪肝の所見は認めなかったが、portal inflammation、lobular inflammation、bile duct damage、fibrosisはB群と比較し、D群で有意に悪化していた。特に肝線維化についてはD群は肝硬変の状態であった。肝組織中のTNFaの発現はD群がB群よりも有意に上昇していたが、他の炎症性サイトカインやケモカインの発現に違いは認めなかった。肝線維化マーカーの発現も各種qRT-PCRで確認したが、病理組織学的所見と同様にD群がB群よりも有意に上昇していた。腸内細菌叢についてもND投与とHFD投与、PBS投与と2OA投与で変化を認めていた。現在、肝線維化に関わる腸内細菌叢について16S rRNA遺伝子によるメタゲノム解析をおこなっている。

类人胆汁酸组成小鼠（Cyp2c70/Cyp2a12双敲除小鼠）分为正常饮食（ND）、高脂饮食（HFD）、2-辛炔酸（2OA）给药组、PBS（对照）给药组。创建组（A：ND+PBS，B：ND+2OA，C：HFD+PBS，D：HFD+2OA）。在10W处死时收集肝脏、胆囊、血液、小肠和粪便，并检查组织病理学评估、肝脏中炎性细胞因子和趋化因子的表达以及肠道菌群。组织病理学评估显示，HFD 治疗组未发现脂肪肝，但 D 组门静脉炎症、小叶炎症、胆管损伤和纤维化明显严重于 B 组。关于肝纤维化，D组处于肝硬化状态。尽管 D 组肝组织中 TNFα 的表达量较 B 组显着升高，但其他炎症细胞因子和趋化因子的表达量无差异。各种qRT-PCR也证实了肝纤维化标志物的表达，与组织病理学结果一样，D组肝纤维化标志物的表达显着高于B组。 ND 和 HFD 给药之间以及 PBS 和 2OA 给药之间也观察到肠道菌群的变化。目前，我们正在利用16S rRNA基因对与肝纤维化相关的肠道菌群进行宏基因组分析。