着床期の胚・子宮内膜相互作用をコントロールする新規分子の解析

植入阶段控制胚胎-子宫内膜相互作用的新分子分析

基本信息

批准号：
22K07920
负责人：
村瀬真理子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07920/
关键词：
卵胞液卵成熟バイオマーカー着床生物学的マーカー胚

项目摘要

移植時の胚と子宮の生殖能力を予測するための技術や信頼性の高い生物学的マーカーも存在しないことが一因となって、生殖補助医療（ART）により妊娠に至る胚は全世界で10％未満にとどまっている。申請者らはヒト卵胞液のプロテオーム解析を行い、妊娠に成功した検体でADAM17の標的分子である新規因子Aの発現が上昇していることを見出した。本研究では、胚でADAMとこの新規因子Aの経路が存在するか検証し、その着床促進能の実態を明らかにすることで、ARTにおける移植胚の選定技術と胚の着床能を向上させる技術開発を目標とした。まず新規因子Aの働きを評価することを当該年度の目標として立て、その研究を遂行した。マウスを用いて、新規因子Aを添加ないしはAに結合し機能阻害すると考えられる抗体を添加した培養液において成熟させた卵を受精させ、胚培養後に胚移植を行った。それにより着床率への影響を及ぼすことが判明し、更なる評価のためにin vivoでの着床を評価するために卵管内へのAもしくは抗A抗体の添加実験、Aの機能部位評価のための蛍光免疫染色病理学的解析を行った。更に、卵の成熟への影響をヒトで調べるために、卵子凍結のため回収したが未成熟であるため凍結基準を満たさず廃棄される未成熟卵をAを添加した培養液で培養することで評価を行った。Aと胚に関する関係性は更に評価を深める予定である。更に、Aの機能経路を明らかにするために今後はまた細胞膜上に存在するAを切り出し可溶型とすることが分かっているADAM17との直接的な作用についての評価を行う計画である。そのために、ADMA17の添加・機能阻害実験を計画している。当該年度においてADAM17と癌細胞の既報などを参考にして実験系の準備を行っており、次年度は実際にその実験を行う予定である。

由于缺乏技术或可靠的生物学标志物来预测植入时胚胎和子宫肥力，因此全球不到10％的胚胎会导致怀孕。申请人对人卵泡液进行了蛋白质组学分析，发现在成功发展妊娠的标本中，新颖因素A（ADAM17的靶标分子）的表达升高。在这项研究中，我们调查了亚当和这个新的因素A在胚胎中是否存在途径，并揭示了促进植入的实际能力，并旨在开发技术以改善艺术中的植入胚胎选择并提高胚胎植入能力。首先，我们设定了评估新因素A功能并进行研究的目标的目标。小鼠被用来在培养基中施肥成熟的卵，其中添加了新因子A或被认为与A结合并抑制功能的抗体，并在胚胎培养后转移胚胎。发现这对植入率有影响，为了进一步评估，在输卵管中添加A或抗A抗体，进行实验，以评估体内植入，并进行荧光免疫染色的病理分析以评估功能部位。此外，为了研究对人类鸡蛋成熟的影响，收集了未成熟的卵以进行鸡蛋冷冻，但由于它们不成熟而被丢弃，因为它们不成熟，对冻结标准不满意，并通过在补充A的培养基中培养它们来评估A。此外，为了阐明A的功能途径，我们计划评估A ADAM17的直接效应，ADAM17已知可以切除和溶解。为此，我们正在计划一个实验，以抑制添加ADMA17和功能。在这个财政年度，我们一直在根据先前报道的ADAM17和癌细胞来准备实验系统，我们计划下一个财政年度实际进行实验。