Exploratory study in immunoadjuvant therapy for pediatric acute myeloid leukemia

小儿急性髓系白血病免疫辅助治疗的探索性研究

• 批准号: 22K07866
• 负责人: 岩本 彰太郎
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07866/
• 关键词: 小児急性骨髄性白血病; アントラサイクリン系抗がん剤; 細胞接着依存性薬剤耐性; 骨髄微小環境; 免疫アジュバント

急性骨髄性白血病(AML)に罹患した小児患者の約3割は再発・難治例である。AMLの治療抵抗性機序として骨髄白血病微小環境で形成される細胞接着依存性薬剤耐性（CAM-DR）が知られているが、その分子機構については十分に解明されていない。本研究の目的は、in vitroヒトAML-骨髄微小環境モデルを用いて、AML治療のキードラッグであるアントラサイクリン系抗がん剤（AAD）に対する AML細胞のCAM-DR克服のためにNFkB 活性化シグナルに着目した免疫アジュバントの探索的研究にある。本年度は以下の実験結果を得た。【AML細胞株の骨髄間質細胞（BMSC）共培養下でのAAD耐性化とNFkB阻害剤の効果の検討】AML細胞株（U937,THP-1, HEL,NB4,Nomo1,MOLM13）の抗がん剤（AADとしてドキソルビシン使用）に対する50％致死濃度（LC50）の決定とBMSC共培養下でのCAM-DR獲得評価：AML細胞株毎に抗がん剤に対するLC50を決定後、BMSC共培養下で無血清培養液を用いてAML細胞株のCAM-DR獲得を殺細胞比率（FACS）で評価した。すべての細胞株がBMSC共培養下でCAM-DRを獲得したことを確認した。【NFkB阻害剤（SN50及びEmetine）による両細胞群共培養下での抗がん剤に対するCAM-DR克服効果の検討】NFkB阻害剤を用いた共培養実験で、AML細胞株（THP-1,HEL,MOLM13）のCAM-DR阻害効果をFACSにて評価した。すべての細胞株で程度の差はあるものの有意差を持ってCAM-DR阻害効果を認めた。本年度は、共培養下での両細胞群（AML細胞株とBMSC）のNFkBに関する分子生物学的変化を評価する前に、NFkB阻害剤の効果を確認することで研究仮説の妥当性を見出すことができた。

大约 30% 的急性髓系白血病 (AML) 儿科患者患有复发或难治性疾病。髓系白血病微环境中形成的细胞粘附依赖性耐药（CAM-DR）是已知的AML治疗耐药的机制，但其分子机制尚未完全阐明。本研究的目的是使用体外人类 AML 骨髓微环境模型，激活 NFkB 以克服 AML 细胞中的 CAM-DR，以响应蒽环类抗癌药物 (AAD)（AAD 是 AML 治疗的关键药物）。以信号为重点的免疫佐剂研究。今年，我们获得了以下实验结果。 [AML细胞系（U937、THP-1、抗癌药物（HEL、NB4、Nomo1、MOLM13）（阿霉素用作 AAD）的 50% 致死浓度（LC50）测定以及 BMSC 共培养下 CAM-DR 获取的评估：对每种 AML 细胞系的抗癌作用 测定 LC50 后对于该药物，在 BMSC 共培养下使用无血清培养基通过细胞杀伤率 (FACS) 评估 AML 细胞系中 CAM-DR 的获得。我们证实所有细胞系在 BMSC 共培养下都获得了 CAM-DR。 [在两个细胞组共培养下检查 NFkB 抑制剂（SN50 和 Emetine）克服抗癌药物 CAM-DR 的效果] 在使用 NFkB 抑制剂的共培养实验中，AML 细胞系（THP-1、CAM -通过FACS评价HEL、MOLM13)的DR抑制效果。尽管程度存在差异，但在所有细胞系中均观察到 CAM-DR 抑制效果具有显着差异。今年，我们将在评估共培养下两个细胞组（AML细胞系和BMSCs）中有关NFkB的分子生物学变化之前，通过确认NFkB抑制剂的作用来找出研究假设的有效性。