KRAS遺伝子変異導入モデルを用いたゴーハム病発症機序解明と新規治療薬の探索

利用KRAS基因突变模型阐明Gorham病的发病机制并寻找新的治疗药物

基本信息

批准号：
22K07839
负责人：
野澤明史
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07839/
关键词：
ゴーハム病

项目摘要

KRAS Q61R変異を発現するトランスジェニックマウスの作製を行う。CAGプロモーター下にLoxP―STOP―LoxP（LSL）を介して KRAS（Q61R）cDNAと、この変異をもつ細胞を追跡できるGFP cDNAを配置した遺伝子断片を生殖細胞に導入したマウスを作製する（LSL-KRAS Q61R-GFPマウス）。これにより、Cre存在下でKRAS Q61R変異を発現するマウスが得られる。KRAS Q61R変異マウス（LSL-KRAS Q61R-GFPマウス）の作製に成功した後、破骨細胞に特異的にKRAS Q61R変異を発現させるために、タモキシフェン（TM）依存的に破骨細胞でCreを発現するマウス（Csf1r-CreERT2マウス）と交配し、TM依存的に破骨細胞でKRAS Q61R変異を発現するトランスジェニックマウスを作製する。同様に、リンパ管内皮細胞に特異的にKRAS Q61R変異を発現させるために、TM依存的にリンパ管内皮細胞でCreを発現するマウス（Prox1-CreERT2マウス）と交配し、TM依存的にリンパ管内皮細胞でKRAS Q61R変異を発現するトランスジェニックマウスを作製する。これらのマウスに、低濃度もしくは高濃度のTMを投与し、出生後に破骨細胞に低頻度もしくは高頻度でKRAS Q61R変異を発現させたトランスジェニックマウスと、出生後にリンパ管内皮細胞に低頻度もしくは高頻度でKRAS Q61R変異を発現させたトランスジェニックマウスを得る。

由表达KRAS Q61R突变的转基因小鼠制成。制作一个小鼠，其中可以跟踪该突变的Kras（Q61R）cDNA和GFP cDNA是在生殖细胞（LSL-KRAS Q61R-GFP小鼠）中产生的。结果，获得了CRE存在中表达KRAS Q61R突变的小鼠。在成功产生KRAS Q61R突变小鼠（LSL-KRAS Q61R-GFP小鼠）之后，在整骨上表达KRAS Q61R突变，CRE在骨病中表达，以骨病的形式表达。一种用TM依赖性细胞表达KRAS Q61R突变的转基因小鼠。同样，为了在淋巴管内皮细胞中特别表达KRAS Q61R突变，TM依赖于小鼠（Prox1-Creert2小鼠），该小鼠用内皮细胞表达CRE，而TM依赖于TM依赖的小鼠。产生Q61R突变与皮肤细胞。具有低或高浓度TM的转基因小鼠对这些小鼠，并且在出生后表达骨细胞中的KRAS Q61R突变，以及出生后淋巴词汇中的内皮。频繁地。