Roles of IgA and gut microbiota in the pathogenesis of multiple sclerosis

IgA 和肠道微生物群在多发性硬化症发病机制中的作用

基本信息

批准号：
22K07527
负责人：
尾村誠一
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kindai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

実験計画に従い IgA 抗体増加試験として、腸内細菌の一種である Alcaligenes faecalis 由来のリポ多糖 (LPS) を、多発性硬化症のウイルス感染マウスモデルであるタイラーウイルス感染マウスに投与し、その影響を解析した。LPS 投与マウスと非投与マウスで体重変化や臨床経過、中枢神経系における病変などに有意な差は見られなかったが、糞便を採取し腸内細菌叢を解析した結果、Alistipes 属菌が LPS 投与マウスで増加していた。Alistipes 属菌がなぜ増加したのかについては、今後明らかにしていければと考えている。また、LPS はアジュバント効果が報告されており、アジュバント自体が腸内細菌叢に影響するかを調べるために、アジュバントとして頻用されている完全フロイントアジュバントをマウスに投与し、腸内細菌叢を解析した。その結果、アジュバントのみの投与で腸内細菌叢が変化しうることを明らかにした。これらのデータをまとめ、論文として投稿した (Omura S, Khadka S, et al., Int J Mol Sci, 2023)。IgA 枯渇試験を行うため、IgA 遺伝子を欠失させた IgA ノックアウト(KO) マウス、およびタモキシフェン投与により IgA 遺伝子発現を抑制できるコンディショナルノックアウトマウスを作製し、系統の確立を行った。予備実験としてIgA KOマウスを用いて実験的自己免疫性脳脊髄炎 (EAE) を誘導すると、EAE の症状悪化が観察された。また、、タイラーウイルス感染マウスにおいて IgA に結合する腸内細菌を同定するために、IgA シーケンシングの確立を目指し、予備実験を行った。データは解析中である。また、本研究に応用できるデータ解析手法として、医科学ビッグデータに対する因子分析の手法を確立し、論文として発表した。

根据实验设计，将脂多糖（LPS）（LPS）衍生自Alcaligenes Faecalis是一种类型的肠道细菌，是针对泰勒病毒感染的小鼠的，这是一种多发性硬化症的病毒感染的小鼠模型，以测试增加IGA抗体，并分析了IGA抗体。在经LPS治疗的小鼠和未处理的小鼠之间，体重变化，临床病程或病变没有显着差异，但是由于粪便和分析肠菌群的结果，在LPS治疗的小鼠中，Alistipes属增加了。我们希望澄清为什么未来的alistipes属细菌增加。此外，LPS报告了辅助作用，为了研究佐剂本身是否影响肠道微生物群，给予小鼠以完成弗朗德的佐剂，该佐剂经常用作佐剂，以分析肠道菌群。结果，发现只有佐剂可以改变肠道菌群。这些数据被编译并提交为论文（Omura S，Khadka S等人，Int J Mol Sci，2023年）。为了进行IgA耗竭测试，我们用已删除的IgA基因制备了IgA基因敲除（KO）小鼠，并有条件的基因敲除小鼠可以通过给予他莫昔芬抑制IgA基因的表达，并确定了菌株。作为初步实验，使用IGA KO小鼠引起的实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）导致EAE症状恶化。另外，进行了初步实验，以鉴定泰勒病毒感染小鼠中与IgA结合的肠道细菌，目的是建立IgA测序。数据正在分析。此外，已经建立了一种可以应用于本研究的数据分析方法的医学分析方法，并已作为论文发表。