インフルエンザウイルスが産生する二本鎖RNAとその自然免疫誘導に関する研究

流感病毒产生的双链RNA及其诱导先天免疫的研究

基本信息

批准号：
22K07099
负责人：
中野雅博
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07099/
关键词：
インフルエンザウイルス二本鎖RNA 自然免疫高速原子間力顕微鏡

项目摘要

ウイルス感染により生じる二本鎖RNAは、宿主の自然免疫を誘導することが知られている。これまでに我々は、二本鎖RNAを作らないものと考えられてきたインフルエンザウイルスの感染細胞において二本鎖RNAが検出されることを明らかとしてきた。しかし、二本鎖RNAが検出される細胞の割合が非常に少ないことから、感染細胞内で二本鎖RNAが産生されるためには、ある特定の条件が必要とされると考えられた。そこで本研究では、インフルエンザウイルス感染細胞において二本鎖RNAが産生される条件およびメカニズムを見出し、二本鎖RNAによる自然免疫誘導機構を明らかにすることを目的とする。本年度はインフルエンザウイルス感染細胞内で二本鎖RNAが産生される条件を検討した。まずは感染させる細胞種を検討した結果、既に二本鎖RNAが産生されることを明らかにしていたVero細胞に加え、A549、HeLa、Huh-7、293T細胞でも二本鎖RNAを検出できた。この結果から、二本鎖RNA産生はどの細胞でも起こりえる普遍的な現象であることが示唆された。続いて二本鎖RNAが産生される感染条件について検討した結果、二本鎖RNAは低いウイルス感染価で感染させた場合に産生され、逆に高いウイルス感染価で感染させた場合は産生されないことが明らかとなった。低いウイルス感染価で感染させた細胞においては１種以上のウイルス蛋白質が欠損することがあると報告されている。そこで次に、二本鎖RNA産生とウイルス蛋白質発現の関係性について調べた。その結果、二本鎖RNAはNS1蛋白質を欠損している感染細胞において検出されることが明らかとなった。この結果から、インフルエンザウイルスは感染細胞内ではNS1により二本鎖RNAをマスクし、自然免疫から逃れているのではないかと示唆された。

已知通过病毒感染产生的双链RNA诱导宿主的先天免疫。迄今为止，我们已经表明，在感染的流感病毒感染细胞中检测到双链RNA，这些细胞被认为不产生双链RNA。但是，由于检测到双链RNA的细胞比例很小，因此人们认为在感染细胞中生产双链RNA需要某些条件。因此，本研究旨在找到在感染流感病毒的细胞中产生双链RNA的条件和机制，并阐明双链RNA先天免疫诱导的机制。今年，我们研究了感染流感病毒的细胞中双链RNA产生的条件。首先，我们研究了要感染的细胞类型，发现在Vero细胞中可以检测到双链RNA，该细胞已经显示出来可产生双链RNA，以及A549，HELA，HUH-7和293T细胞。这些结果表明，双链RNA产生是一种通用现象，可以在任何细胞中发生。接下来，我们研究了产生双链RNA的感染条件，并发现当被低病毒感染性滴度感染时会产生双链RNA，并且在被高病毒感染性滴度感染时不会产生。据报道，一种或多种病毒蛋白可能缺乏感染低病毒感染滴定器的细胞。接下来，我们研究了双链RNA产生与病毒蛋白表达之间的关系。结果，发现在NS1蛋白缺乏的感染细胞中检测到双链RNA。这些结果表明，流感病毒通过掩盖双链RNA并逃脱了先天免疫力，掩盖了感染细胞中的双链RNA。