Lipid Reprogramming Mechanism of Hepatitis Virus

肝炎病毒脂质重编程机制

• 批准号: 22K07111
• 负责人: 塩田 智之
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Foundation for Biomedical Research and Innovation at Kobe
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07111/
• 关键词: A型肝炎ウイルス(HAV); 極長鎖脂肪酸; RNAseq解析; 脂肪酸合成酵素; 脂肪酸伸長酵素; A型肝炎ウイルス; レプリケーションコンパートメント; リピドミクス解析

本研究の目的はA型肝炎ウイルス(HAV)のCRISPRゲノムワイドスクリーニングによって同定された脂質代謝に重要な役割を果たす、ACACA、HSD17B12のHAV生活環における役割を明らかにすることにより、HAVが脂質代謝を変化させ、極長鎖脂肪酸をどのように効率的な複製機構に利用しているかを明らかにすることである。各因子ノックアウト細胞による予備的な検討により、ACACAによりコードされるACC１、HSD17B12によりコードされる17β-HSD12がHAVの複製に重要であることが示唆されている。初年度に予定していた下記３項目について下記の様な結果を得ている。①KO表現系のAdd-back系の構築についてはセロチン酸(26:0)によるウイルス増殖の回復を確認した。②宿主側責任候補遺伝子の同定については、RNAseq解析により得られている感染後発現の増加する因子の内、脂肪酸伸長酵素ELOVL４はノックダウンによってウイルス増殖を抑制することが分かっていたが、感染後７日、14日においてタンパク質レベルで発現が増加していることを確認することができた。③SREBP成熟を介した極長鎖脂肪酸合成経路について検討を行なったが、感染後７日、14日においてタンパク質レベルでSREBPの成熟を観察することができなかった為、その他の経路を介したmTOR非依存的経路の存在が示唆される。これらの結果から、極長鎖脂肪酸がHAVの増殖に重要であり、感染によるELOVL4の増加が極長鎖脂肪酸合成を促進するが、その合成経路はmTORに依存しないことが明らかとなった。

这项研究的目的是，HAV是通过阐明ACACA和HSD17B12在HSD17B12的HAV活环中的作用，这在脂质代谢中起着由CRISPR基因组广泛筛选A（HAV）的重要作用更改并阐明如何将极限链脂肪酸用于有效的重复机制。每个因子基因敲除细胞的初步检查表明，由ACACA和HSD17B12编码的17β-HSD12对HAV重复很重要。安排第一年的以下三项已获得以下结果。 （1）关于构建KO表达系统的添加添加系统，确认了用细胞酸恢复病毒生长（26：0）。 （2）对于鉴定宿主主责任候选者，发现通过RNASEQ分析获得的脂肪酸伸长酶Elovl4增加了感染后，可以通过敲除抑制病毒的生长。在第7和14位的蛋白质水平上有所增加。 （3）检查极端链脂肪酸的合成途径通过成熟的SREBP，但在感染的第7和14号，不可能在蛋白质水平上观察成熟的SREBP，因此MTOR non -non -non non non的存在建议一条依赖的路线。这些结果表明，极端的链脂肪酸对于HAV的生长很重要，而感染引起的ELOVL4的增加促进了极端链脂肪酸的综合，但合成途径不取决于MTOR。