進行大腸癌における転移特異的な代謝表現型に関する研究

晚期结直肠癌转移特异性代谢表型的研究

• 批准号: 22K06989
• 负责人: 廣瀬 善信
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06989/
• 关键词: 進行大腸癌; 代謝酵素; 脈管侵襲; 簇出; 代謝; 転移; グルタミナーゼ; 乳酸脱水素酵素

本研究は、進行大腸癌の簇出を含む発育先進部で、代謝酵素であるglumaminase（GLS1）高発現およびlactate dehydrogenase A （LDHA）低発現が部位特異的に生じている意義を解明することが目的である。今年度は、それら代謝表現型と転移の関連性を探るため、①進行大腸癌症例のリンパ節、肝等転移先におけるGLS1/LDHA発現の免疫組織化学的評価、②進行大腸癌症例における転移途上（脈管侵襲）でのGLS1/LDHA発現の免疫組織化学的評価、③転移途上を模した実験的培養環境における、大腸癌細胞株でのGLS1/LDHA発現の誘導性評価、の三点を実施予定とした。①転移を伴う進行大腸癌症例における免疫組織化学により、転移部位（リンパ節、肝）でのGLS1およびLDHAの発現は、原発部位と概ね類似傾向にあることが確認できた。②転移を伴う進行大腸癌手術の原発部位において、転移途上＝脈管侵襲におけるGLS1/LDHA発現を検索した。この検索には、代謝関連因子の免疫組織化学に加えて、リンパ管同定のため D2-40免疫組織化学、および静脈同定のための弾性線維染色を、同一切片上で行う三重染色施行が必要である。時間を要したものの、この安定的な染色手技が確立できた。その三重染色切片におけるGLS1/LDHA発現部位および半定量的発現を評価したところ、簇出部位と脈管侵襲におけるGLS1/LDHA発現は概ね類似することが確認できた。③未実施となったが、その前提となる①②は当初予測された結果と矛盾しなかったため、計画通り培養細胞実験を進めることができると考えられる。

本研究旨在阐明代谢酶谷氨酰胺酶（GLS1）高表达和乳酸脱氢酶A（LDHA）低表达在发育晚期区域（包括晚期结直肠癌的萌发）中的位点特异性发生的意义。目的。今年，为了探讨这些代谢表型与转移之间的关系，我们将进行（1）晚期结直肠癌病例中淋巴结和肝脏等转移部位GLS1/LDHA表达的免疫组化评估，以及（2）免疫组化评估晚期结直肠癌病例中淋巴结和肝脏等转移部位的 GLS1/LDHA 表达。我们计划开展三点：（3）在模拟转移的实验培养环境中评估结直肠癌细胞系中GLS1/LDHA表达的免疫组织化学评估等。 ①晚期结直肠癌转移病例的免疫组化证实，转移部位（淋巴结、肝脏）GLS1和LDHA的表达与原发部位趋于相似。 ② 检索晚期结直肠癌转移期原发部位血管侵犯转移期 GLS1/LDHA 的表达情况。该搜索需要对同一切片进行三重染色，包括代谢相关因子的免疫组织化学、识别淋巴管的 D2-40 免疫组织化学以及识别静脉的弹性纤维染色。虽然花了一些时间，但我们还是能够建立这种稳定的染色技术。当我们评估三重染色切片中的 GLS1/LDHA 表达位点和半定量表达时，我们证实 GLS1/LDHA 在咽部部位和血管侵犯中的表达大致相似。 ③虽然没有进行，但假设①和②与最初预测的结果并不矛盾，因此认为培养细胞实验可以按计划进行。