脳卒中・認知症治療標的の探索を企図した細胞間相互作用の時空間的解析

细胞间相互作用的时空分析旨在寻找中风和痴呆的治疗靶点

基本信息

批准号：
22K06865
负责人：
肱岡雅宣
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

脳内出血（ICH）およびアルツハイマー病（AD）はいずれも根治療法が確立されていない疾患である。本研究では両疾患で増加する走化性因子に注目した解析を行うためにサイトカイン／ケモカインを網羅的に探索した結果、ケモカインXが両疾患モデルマウスの脳内で著明に増加することを見出した。まず、認知症モデルとしてアミロイドβ（Aβ）の蓄積およびグリオーシスを呈す前臨床性ADモデルマウスであるApp KIマウス（6ヶ月齢）を用いた解析に着手した。App KIマウスにおけるケモカインX産生細胞を同定すべく単一分子蛍光in situハイブリダイゼーション（smFISH）と免疫組織化学染色の共染色を実施したところ、Aβの蓄積部位に集簇するミクログリアでケモカインXの高発現が認められた。一方でAβが蓄積しない部位のミクログリアではケモカインXの発現が認められなかったことから、Aβに集簇するミクログリア特異的な遺伝子発現変化であることが示唆された。今後はAβ周囲のミクログリアの性状に焦点を当てて解析を進める。また、ケモカインX欠損マウスに対してコラゲナーゼ投与により脳内出血惹起した結果、野生型マウスと比較してケモカインX欠損マウスでは運動機能障害の重篤度が軽減される傾向が見られた。今後は試行回数を増やすとともに病理組織解析についても進める。加えて、ADモデルマウスで行ったようにsmFISHを実施することでケモカインX産生細胞の同定を行い、空間特異的な変化を見出すべく解析を進める。

脑内出血（ICH）和阿尔茨海默氏病（AD）都是尚未确定自由治疗的疾病。在这项研究中，我们全面探索了细胞因子/趋化因子，以进行分析，重点是两种疾病中增加的趋化因子，并发现在两种疾病上模拟的小鼠的大脑中，趋化因子X显着增加。首先，我们开始使用App Ki小鼠（6个月大），这是一种临床前AD模型小鼠，该模型表现出淀粉样β（Aβ）和神经胶质病作为痴呆模型的积累。为了鉴定App Ki小鼠中的趋化因子X产生细胞，使单分子荧光原位杂交（Smfish）和免疫组织化学染色成本呈现出在Aβ积累部位积聚的微胶质细胞中的趋化因子X的高表达。另一方面，在小胶质细胞中未观察到趋化因子X的表达，在小胶质细胞中，Aβ不会积聚，这表明它是在Aβ中积累的小胶质细胞特异性基因表达变化。将来，我们将继续我们的分析，重点关注小胶质细胞围绕Aβ的性质。此外，脑出血是通过对趋化因子X缺陷型小鼠施用胶原酶诱导的，因此，与野生型小鼠相比，在趋化因子X缺陷型小鼠中有运动功能障碍的严重程度。将来，我们将增加试验的数量，并进行病理组织学分析。另外，通过在AD模型小鼠中进行smfish来鉴定趋化因子X产生细胞，并进行分析以发现空间特定的变化。