黄色ブドウ球菌免疫回避タンパク質SSL11によるマスト細胞の機能制御機構の解明

阐明金黄色葡萄球菌免疫逃避蛋白SSL11对肥大细胞功能的控制机制

基本信息

批准号：
22K06686
负责人：
奥輝明
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Hoshi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06686/
关键词：
マスト細胞アレルギー Coronin-1 SSL11 黄色ブドウ球菌

项目摘要

本研究は、黄色ブドウ球菌が産生する免疫回避決定因子の一つであるStaphylococcus superantigen-like protein 11（SSL11）やマスト細胞に発現するアクチン結合タンパク質Coronin-1に焦点を当て、アレルギー応答におけるマスト細胞の機能制御機構の解明を目指している。これまでの研究により、①SSL11はマスト細胞（マウス骨髄由来マスト細胞：BMMCおよびRBL-2H3）に結合し、抗原抗体複合体依存的な脱顆粒反応を抑制すること、②抗原抗体複合体刺激されたBMMCやRBL-2H3では、Coronin-1の412番目のセリン残基（Ser412）が一過性にリン酸化されること、③Ser412のリン酸化はPKCαによって制御されていることを明らかにしている。2022年度の研究結果より、マスト細胞へのSSL11の前処理は、Coronin-1のSer412のリン酸化に影響を及ぼすことが示された。また、同処理はMAPキナーゼであるJNKのリン酸化を抑制していることが明らかになり、SSL11はこれらの現象を介してマスト細胞の機能に影響を与えている可能性が示された。さらに、Coronin-1のSer412のリン酸化が、マスト細胞の機能に与える直接的な影響を調べるために、CRISPR/Cas9により、Ser412をアラニン残基またはアスパラギン酸残基へと変異させた遺伝子改変マウスの作製を行った。現在、遺伝的背景を揃えるために戻し交配を行っている。また、BMMCに発現するSSL11のターゲット分子を特定し、RNA干渉法により、その発現を減弱させたRBL-2H3株を樹立した。

这项研究的重点是葡萄球菌超抗原样蛋白11（SSL11），这是金黄色葡萄球菌产生的免疫逃避决定因素之一，以及在肥大细胞中表达的肌动蛋白结合蛋白冠状酸1，旨在阐明肥大细胞在过敏反应中的功能调节机制。先前的研究表明，1）SSL11结合了肥大细胞（小鼠骨髓衍生的肥大细胞：BMMC和RBL-2H3），并抑制抗原抗体复合物依赖性脱粒反应； 2）用抗原 - 抗体复合物刺激的BMMC和RBL-2H3中瞬时磷酸化的丝氨酸残基412（Ser412）； 3）SSL11磷酸化由PKCα确定。 2022年研究的结果表明，将SSL11预处理到肥大细胞中会影响Coronin-1中Ser412的磷酸化。此外，据显示，这种治疗方法抑制了MAP激酶JNK的磷酸化，并证明SSL11可能通过这些现象影响肥大细胞的功能。此外，为了研究Coronin-1 Ser412磷酸化对肥大细胞功能的直接作用，通过将Ser412突变为CRISPR/CAS9创建转基因的小鼠，从而创建了Ser412或天冬氨酸残基。目前，正在进行反向交叉以对齐遗传背景。此外，鉴定了在BMMC中表达的SSL11的靶分子，并且通过RNA干扰法确定了减弱其表达的RBL-2H3菌株。