魚類寄生単生類の宿主認識分子機構

鱼类寄生单殖纲宿主识别分子机制

• 批准号: 22K05835
• 负责人: 田角 聡志
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05835/
• 关键词: 寄生虫; 遺伝子編集; 宿主特異性; 魚類; 単生類; 糖鎖

alpha-1,3-fucosyltransferase 7（FUT7）遺伝子の機能を欠失したクサフグの作出を継続して行った。まず、昨年度変異導入の確認された1個体のオス（F1）由来凍結保存精子と、今年度得られた、変異導入の確認された１個体のメス（F1）由来の卵を用いて人工授精を行い、F2世代を得た。これらの一部について、変異導入を調べたところ、用いたメス（F1）の片側のアリルは6塩基欠損の、in frame欠損をもつことが分かった。この欠損が機能喪失へと繋がるのかについては、今のところ定かではない。用いたメス（F1）については、フレームシフトが起こりそうな配列であった。このことから、今回作出したF2については、FUT7の機能が失われていない可能性があることが分かった。次に、両アリルに変異をもつ変異体（バイアレリック変異体）を少しでも短い時間で得たいと考え、2021年に予め作成しておいた、2019年F0家系のメスと2020年F1家系のオス（前述と同一個体）とを掛け合わせた家系を作出し、実験を行った。変異導入を調べたところ、全個体の約10%がバイアレリック変異体であった。この家系を用いてエラムシの感染実験を行ったところ、バイアレリック変異体、ヘテロ変異体、野生型のいずれの場合も、着定虫体数に統計的有意な差はみられなかった。そこで、同一個体群を用いて、鰓におけるL-フコースの存在様式を調べたが、やはり全ての個体で大きな差はみられなかった。以上の結果より、FUT7遺伝子一つの機能を失わせただけでは、L-フコースの転移には影響を与えないことが考えられた。

我们继续产生甲虫上的河水，这些河豚失去了α-1,3-螺旋糖基转移酶7（FUT7）基因的功能。首先，我们使用男性（F1）的冷冻保存精子进行了人工授精，这些精子已被确认已被突变，而女性（F1）的卵被证实今年已突变，导致F2产生。当其中一些被检查是否有诱变时，发现使用的女性（F1）的一侧的allyle在框架缺乏症中具有6碱基缺陷。目前尚不清楚这种缺陷是否导致功能丧失。使用的女性（F1）是可能导致移架的序列。这表明这次创建的F2可能不会丢失FUT7的功能。接下来，我们想在短时间内尽可能少地获得一个具有突变的突变体（双重突变体），因此我们创建了一个家庭，该家庭将来自2019 F0家族的女性与2020 F1家族的雄性（与上述相同的个体）相比，我们在2021年提前创建了我们，并进行了一个实验。当检查诱变时，所有个体中约有10％是双重突变体。当使用该家族进行Elimbulls的感染实验时，在双质，异源或野生型的情况下，在昆虫数量上没有统计学上的显着差异。因此，我们使用相同的人群研究了gill中L-藻糖的存在方式，但是在所有个体中均未观察到显着差异。从以上结果来看，人们认为失去FUT7基因的一个功能不会影响L-羟基转移。