Mechanistic analysis for the immune activation of T cells by covalent natural compounds

共价天然化合物对 T 细胞免疫激活的机制分析

• 批准号: 22K05355
• 负责人: 竹本 操
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05355/
• 关键词: 共有結合性天然化合物; T細胞免疫機能の賦活化; がん免疫治療; T細胞の免疫機能

申請者が発見したT細胞の免疫機能を亢進する共有結合性天然化合物には、様々な類縁体が存在する。今回、その類縁体を用いて、その共有結合性天然化合物の構造活性相関をより詳細に評価した。その結果、構造にあるマイケル受容体も活性に重要であることがわかった。マイケル受容体は、タンパク質中のシステイン残基と共有結合する特性がある。この共有結合性天然化合物が標的タンパク質中のシステイン残基と共有結合するのか、ゲルシフトアッセイ法により検討した結果、共有結合性化合物は野生型標的タンパク質と共有結合するが、標的タンパク質CS変異体では結合しなかった。また、マイケル受容体の二重結合を単結合にした類縁体は標的タンパク質と共有結合できなかった。よって、共有結合性天然化合物のマイケル受容体は、標的タンパク質のシステイン残基と共有結合するのに重要であり、T細胞の活性化を増加することがわかった。この共有結合性天然化合物の標的タンパク質下流因子について評価したところ、この共有結合性天然化合物の添加により、その下流因子は著しく活性化していた。また、この下流因子の阻害剤と共有結合性天然化合物をT細胞に共処理すると、T細胞免疫賦活化能が相殺された。よって、この共有結合性天然化合物は、標的タンパク質と共有結合することで、その下流因子の活性を促進し、T細胞の活性を増加したがわかった。最近、ミトコンドリア機能の向上が、T細胞の活性に重要であることが報告されている。実際に、シーホースを用いて、この共有結合性天然化合物の添加により、プライマリーT細胞のミトコンドリア機能が亢進したことがわかった。最後に、マウスモデル実験で、がん免疫治療との併用治療において、この共有結合性天然化合物の有効性が実証された。

共有天然化合物中有各种类型的共享体，可增强申请人发现的T细胞的免疫功能。这次，使用分离的边缘更详细地评估了CO结合的天然化合物的结构活性相关性。结果，发现结构中的迈克尔受体对于活动也很重要。迈克尔受体具有与蛋白质中半胱氨酸残基共享的特征。该均具有与靶蛋白中半胱氨酸残基共享的共同结合的天然化合物共享，由于检查了Gelsift测定，共享组合化合物与野生型靶靶蛋白共享共享组合化合物，但在靶蛋白CS突变体中我没有。此外，迈克尔受体双键是单一结合的两个生物无法与靶蛋白共享。因此，发现共享结合天然化合物的迈克尔受体对于与靶蛋白半胱氨酸残基共享非常重要，从而增加了T细胞的激活。在评估该CO结合天然化合物的靶蛋白和下游因子后，添加该CO构成的天然化合物已显着激活下游因子。此外，下游因子的抑制剂和co结合的天然化合物的抑制剂对T细胞的co进行了处理。因此，发现与靶蛋白共享的co结合天然化合物促进了下游因子的活性，并增加了T细胞的活性。最近，据报道，线粒体功能的改善在T细胞的活性中很重要。实际上，发现使用海马添加这种CO结合的天然化合物已增强了原代T细胞的线粒体功能。最后，小鼠模型实验证明了该CO结合的天然化合物在癌症免疫疗法结合治疗中的有效性。

项目成果

New chemical tool enabling monitoring of intracellular phase separation condensate aggregation and hardening

新的化学工具能够监测细胞内相分离冷凝物聚集和硬化

• 发表时间: 2022
• 作者: Asmaa Mostafa Abdelbari Soliman Farrag;Misao Takemoto;Masahiro Abo;Yuichi Hori;Kazuya Kikuchi;Motonari Uesugi
• 通讯作者: Motonari Uesugi

共有結合性天然化合物によるT細胞免疫賦活化機構の解析

共价天然化合物T细胞免疫激活机制分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 竹本 操;安保 真裕;上杉 志成
• 通讯作者: 上杉 志成

Real-Time Visualization of Cellular Phase-Separating Proteins

细胞相分离蛋白的实时可视化

• 发表时间: 2023
• 作者: Asmaa Mostafa Abdelbari Soliman Farrag;Misao Takemoto;Masahiro Abo;Yuichiro Hori;Kazuya Kikuchi;Motonari Uesugi
• 通讯作者: Motonari Uesugi