水晶振動子マイクロバランス法を用いた流動場における線溶ダイナミクスの解明

使用石英晶体微天平法阐明流场中的纤溶动力学

• 批准号: 22K03556
• 负责人: 外山 吉治
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Takasaki University of Health and Welfare
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K03556/
• 关键词: 線溶; フィブリンソフトクロット; フィブリンハードクロット; 水晶振動子マイクロバランス; フィブリン; プラスミン; 流動場

本年度の研究実績は次の１）～３）である。１）静止場におけるソフトクロット線溶へのプラスミン濃度の影響：0.25 mg/mLフィブリノゲン水溶液にトロンビンを0.25 U/mLを加えて水晶振動子表面にソフトクロットを作製した。これにプラスミンを0.01および0.05 U/mLになるように添加し、線溶にともなう周波数変化を測定した。その結果、線溶に要する時間は0.01 U/mLでは25分、0.05 U/mLでは5分と酵素濃度の増加により減少した。２）静止場におけるソフトクロット線溶へのトロンビン濃度の影響：ソフトクロットのゲルネットワーク構造はトロンビン濃度によって影響を受ける。0.25 mg/mLフィブリノゲン水溶液にトロンビンを0.025および0.25 U/mLを加えて振動子表面にソフトクロットを作製した。これにプラスミンを0.01 U/mLになるように添加し、線溶にともなう周波数変化を測定した。クロット形成に要する時間は0.025 U/mLで約75分、0.25 U/mLでは約25分とトロンビン濃度の増加によりゲル形成時間は短縮した。一方、線溶に要する時間は0.025 U/mLで約120分、0.25 U/mLでは約25分と時間をかけて作製したクロットの方か線溶に要する時間が長くなった。３）静止場におけるハードクロット線溶へのプラスミン濃度の影響：カルシウムキレート剤により凝固阻止されてウシ由来血漿に塩化カルシウムを25 mM加えて水晶振動子表面にハードクロットを作製した。プラスミンを0.2 U/mLになるように添加し、線溶にともなう周波数変化を測定した。その結果、60分以上が経過しても線溶に伴う周波数変化は見られなかった。このことから、流れのない静止場ではプラスミンによるハードクロットの線溶は起こらないことが分かった。

今年的研究结果如下：1）至3）。 1）纤溶酶浓度对固定场中软凝块纤维蛋白溶解的影响：通过在纤维蛋白原水溶液中添加0.25 u/ml的凝血酶，在石英晶体振荡器的表面制备软凝块。将纤溶酶添加到0.01和0.05 U/mL中，并测量与纤维蛋白溶解相关的频率变化。结果，通过酶浓度的增加，在0.01 u/ml和0.05 u/ml时，纤维蛋白溶解所需的时间减少了，在5分钟时。 2）凝血酶浓度对固定场中软凝块纤维蛋白溶解的影响：软血块的凝胶网络结构受凝血酶浓度的影响。通过将0.025和0.25 U/ml的凝血酶添加到水溶液中，在0.25 mg/ml纤维蛋白原溶液中加入0.025和0.25 U/ml的凝血酶，制备了软凝块。将纤溶酶添加到以达到0.01 u/ml中，并测量与纤维蛋白溶解相关的频率变化。凝块形成所需的时间约为75分钟，在0.025 u/mL时，在0.25 u/ml时约25分钟，由于凝血酶浓度的增加，缩短了凝胶形成所需的时间。另一方面，纤维蛋白溶解所需的时间约为0.025 u/ml，在0.25 u/ml下约25分钟，或增加纤维蛋白溶解所需的时间。 3）纤溶酶浓度对固定场中硬凝块纤维蛋白溶解的影响：通过钙螯合剂预防凝结剂，将25 mm的氯化钙添加到牛血浆中，以准备石英晶体振荡器表面的硬凝块。将纤溶酶添加到0.2 U/mL中，以测量与纤维蛋白溶解相关的频率变化。结果，即使在60分钟或更长时间后，由于纤维蛋白溶解的频率也没有变化。这表明纤溶酶对硬质凝块的纤维蛋白溶解在无流量的固定场中不会发生。