新型コロナウイルスの感染予防抗体を誘導する次世代の非増殖型組換え生ワクチンの開発

开发下一代非复制重组活疫苗，诱导抗体预防新型冠状病毒感染

基本信息

批准号：
21K19681
负责人：
内藤忠相
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Kawasaki Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-07-09 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本課題は、新型コロナウイルスSARS-CoV-2の感染予防に資する新規ワクチンの開発を試みており、具体的には生ワクチンと不活化ワクチンの長所を備えた非増殖型の組換えワクチンの創出を目指している。SARS-CoV-2の主要ウイルス抗原はSpike蛋白質であるため、本研究計画では「感染性は失活しているが免疫原性を保持するSARS-CoV-2の変異型Spike抗原」を人為的な変異導入スクリーニングにより単離した後、組換えワクチンの母体として安全性が確保済みの水疱性口内炎ウイルス（Vesicular stomatitis virus: VSV）に変異型Spike抗原を搭載させることで非増殖型ワクチンの開発を試みる。Wuhan-Hu-1株のSpike蛋白質を用いて、ウイルス中和抗体の主たる認識部位である受容体結合領域（Receptor binding motif: RBM）の全アミノ酸配列（71残基）のそれぞれをアラニン残基に置換した変異型Spike遺伝子セットを合成し、変異型Spike蛋白質を動物培養細胞に発現させるプラスミドセットを作製した。現在は、ACE2受容体蛋白質との結合に関与するRBM内のアミノ酸残基の同定を試みており、ACE2に結合しない単一アミノ酸変異型Spike蛋白質（=感染性が失活している）の単離を進めている。感染性が失活している単一アミノ酸変異型Spike蛋白質が免疫原性を保持しているかどうかを調べるため、既に作製済みのマウス由来抗Spikeモノクロナール抗体を用いた酵素免疫測定法等により独自のSpikeワクチン抗原の取得を進めている。

这个问题是试图开发一种新的疫苗，该疫苗将有助于防止新型冠状病毒SARS-COV-2的传播，并特别旨在创建一种非增殖的重组疫苗，并具有现场直播和灭活疫苗的优势。 Since the major viral antigen of SARS-CoV-2 is the Spike protein, this research plan attempts to develop a non-proliferative vaccine by isolating "a mutant Spike antigen of SARS-CoV-2, which is inactive infectious but retains immunogenicity" by artificial mutagenesis screening, and then applying a mutant Spike antigen to the vesicular stomatitis virus (VSV), which has been secured作为重组疫苗的父母，带有突变峰抗原。使用Wuhan-Hu-1菌株的尖峰蛋白，合成了突变的尖峰基因集，其中所有氨基酸序列（71个残基）的受体结合基序（RBM）是中和中和抗体的主要识别位点，用丙氨酸残基和质粒培养蛋白蛋白质蛋白质蛋白质替换为中和抗体。当前，我们正在尝试鉴定RBM中与ACE2受体蛋白结合的氨基酸残基，并且目前正在分离单个氨基酸突变峰蛋白，该氨基酸突变峰蛋白不与ACE2结合（= =失活的感染性）。为了研究一种灭活感染性，保留免疫原性的单个氨基酸突变尖峰蛋白是否使用酶免疫测定法使用小鼠衍生的抗尖峰单克隆抗体来获取自己的峰值疫苗抗原。