ネオアンチゲン反応性リンパ球を用いた治療抵抗性乳癌治療法の開発

使用新抗原反应性淋巴细胞开发耐药性乳腺癌治疗方法

• 批准号: 21K19532
• 负责人: 久保 真
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19532/
• 关键词: ネオアンチゲン; 体細胞性遺伝子変異; ペプチド; TIL; MHCテトラマー解析; 腫瘍浸潤リンパ球（TIL）

がん細胞に特異的に生じる体細胞性遺伝子変異に由来するペプチドであるネオアンチゲン（以下、ネオ抗原）は、がん細胞特異的で、高い免疫原性を持っていることをより深く解明し、臨床応用へと繋げる。１．乳癌のネオ抗原解析、ネオ抗原ペプチドの作成：（１）ネオ抗原の解析；生検もしくは手術検体より採取した新鮮腫瘍組織から全エクソーム解析とRNAシークエンスを行い、ネオ抗原を解析した。（２）ネオ抗原ペプチドの作製；非同義一塩基置換すなわちアミノ酸置換を伴う遺伝子変異数を算出する。変異ペプチドに応じたRNA発現とHLAに対する親和性をソフトウエアで解析してネオ抗原ペプチドを予測する。２．転移リンパ節に潜むTILの機能解析：（１）転移リンパ節に潜む腫瘍浸潤リンパ球（TIL）の機能解析；細胞ひとつひとつの遺伝子発現を調べるシングルセルRNA解析を用い、原発腫瘍と腋窩リンパ節転移の腫瘍微小環境を比較する。また、多重蛍光免疫染色の技術を用いて40種類以上のタンパク質抗原の発現を画像化して「空間情報＋プロテオミクス」解析により腫瘍微小環境におけるTILの機能を評価する。（２）細胞医薬・TIL強化療法；腫瘍内もしくは周囲（末梢血を含む）よりTILを採取する。ネオ抗原を認識するエピトープを持つリンパ球を抽出し強化・増殖させる、もしくはネオ抗原ペプチドを認識する樹状細胞と共培養してT細胞を強化する。３．ネオ抗原ペプチド樹状細胞ワクチンによる強化TILの機能解析：上記で予測されたネオ抗原ペプチドを自己PBMCから樹立した樹状細胞にパルスし、TILと共培養する。TILの強化の意義をElispot試験、細胞障害試験で実証した。

Neoantigen（以下称为新抗原）是一种源自癌细胞中特别发生的体细胞突变的肽，是癌细胞特异性的，具有高免疫原性，导致临床应用。 1。对乳腺癌的新抗原分析，新抗原肽的制备：（1）新抗原的分析：整个外显子分析和RNA序列是从活检或手术标本收集的新鲜肿瘤组织中进行的，以分析新抗原。 （2）新抗原肽的制备：计算基因突变的数量，并伴随着非义义单试取代，即IE，氨基酸取代。使用软件来预测新抗原肽的RNA表达和对突变肽的HLA的亲和力。 2。在转移性淋巴结中潜伏的TIL的功能分析：（1）潜伏在转移性淋巴结中的肿瘤浸润淋巴细胞（TILS）的功能分析；使用单细胞RNA分析比较原发性肿瘤和腋窝淋巴结转移的肿瘤微环境，该分析检查了每个细胞的基因表达。另外，多种荧光免疫染色技术用于成像40多种不同蛋白质抗原的表达，并且通过“空间信息 +蛋白质组学”分析评估TIL在肿瘤微环境中的功能。 （2）细胞药物和直接强化治疗； TIL是从肿瘤内部或周围收集的（包括外周血）。提取，增强和生长或与识别新抗原肽增强T细胞的树突状细胞提取，增强和生长或共同培养，鉴定新抗原的表位淋巴细胞。 3。与新抗原肽树突状细胞疫苗增强的功能分析：预测的新抗原肽从自体PBMC脉冲到通过与TIL共培养建立的树突状细胞中。在ELISPOT和细胞毒性测试中证明了增强TIL的重要性。

项目成果

TN乳癌の治療戦略・DNA損傷と腫瘍免疫

TN乳腺癌的治疗策略：DNA损伤与肿瘤免疫

• 发表时间: 2022
• 作者: Hayashi Saori;Kubo Makoto;Kaneshiro Kazuhisa;Kai Masaya;Yamada Mai;Morisaki Takafumi;Takao Yuka;Shimazaki Akiko;Shikada Sawako;Nakamura Masafumi;久保 真
• 通讯作者: 久保 真

CCND1 Copy Number Variation in Circulating Tumor DNA from Luminal B Breast Cancer Patients

Luminal B 乳腺癌患者循环肿瘤 DNA 中的 CCND1 拷贝数变异

• DOI: 10.21873/anticanres.15904
• 发表时间: 2022
• 期刊: Anticancer Research
• 影响因子: 2
• 作者: SHIMAZAKI AKIKO;KUBO MAKOTO;KURATA KANAKO;TAKAO YUKA;HAYASHI SAORI;HARADA YURINA;KAWAJI HITOMI;KANESHIRO KAZUHISA;YAMADA MAI;KAI MASAYA;NAKAMURA MASAFUMI
• 通讯作者: NAKAMURA MASAFUMI

シングルセルRNA sequencingシークエンシングを用いたHER2陽性乳癌治療抵抗性の網羅的遺伝子解析

使用单细胞 RNA 测序对 HER2 阳性乳腺癌治疗耐药性进行综合遗传分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 林 早織;久保 真;森 瞳美;甲斐 昌也;山田 舞;金城 和寿;森崎 隆史;高尾 由佳;島﨑 亜希子;中村 雅史
• 通讯作者: 中村 雅史

Significance of the Multi-gene Panel myRisk in Japan

多基因面板 myRisk 在日本的意义

• DOI: 10.21873/anticanres.15907
• 发表时间: 2022
• 期刊: Anticancer Research
• 影响因子: 2
• 作者: HAYASHI SAORI;KUBO MAKOTO;MATSUZAKI SAWAKO;KAI MASAYA;MORISAKI TAKAFUMI;YAMADA MAI;KANESHIRO KAZUHISA;TAKAO YUKA;SHIMAZAKI AKIKO;NAGAYOSHI KINUKO;MIZUUCHI YUSUKE;NAKAMURA MASAFUMI
• 通讯作者: NAKAMURA MASAFUMI

HBOC診療の現状と課題

HBOC治疗现状及挑战

• 发表时间: 2022
• 作者: 久保 真;鹿田 佐和子;甲斐 昌也;森崎 隆史;木村 緑;小川 昌宣;加藤 聖子;水内 祐介;中村 雅史
• 通讯作者: 中村 雅史