癌関連口腔レンサ球菌由来抗原の感染発癌における病原性の解明

阐明癌症相关口腔链球菌抗原在传染性致癌过程中的致病性

基本信息

批准号：
22K09945
负责人：
下山佑
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Iwate Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

上部消化管の扁平上皮癌発症のリスク因子として口腔常在菌であるStreptococcus anginosus が注目されている．申請者らはこれまでに本菌の病原因子について検討を重ね、本菌が特異的に分泌するTyrosyl-tRNA synthetase (YARS) が，細胞からの炎症性サイトカインや一酸化窒素の産生を誘導する新たな病原因子となることを明らかにしてきている．本研究では，このS. anginosus YARSが変異により強毒化した場合に上部消化管での生物発癌因子となる，との仮説のもと検討を行なった．岩手医科大学分子微生物学分野に保有されているS. anginosus 健常者と癌患者由来臨床分離株計8株について、それらのYARS遺伝子をPCR法により増幅した。得られたPCR産物の精製を行い、DNAシーケンスにより健常者由来株と口腔がん由来株のYARS塩基配列の比較検討を行なった。その結果、健常者由来株と口腔がん由来株ではYARSの塩基配列は98.7%以上の高い相同性を示したものの、口腔がん由来株でのみ共通したアミノ酸変異を認める部位 (position; 286, 304, 384, 392)があることを見出した。また、臨床分離株単離のための培養法についても検討を行い、酢酸を用いてpH5.0に調整したMS寒天培地において生育することを見出した。さらにこの培地では、S. mutansとS. sobrinusを除く口腔レンサ球菌の発育が阻害されることも見出した。今後、臨床分離株のYARS配列の解析を行い、遺伝子組換え体を用いた病原性の検討が行われることにより、上部消化管生物発がんに関わる高病原性のS. anginosusの存在が明らかになるものと考える。

咽峡炎链球菌是一种常见的口腔细菌，作为上消化道鳞状细胞癌发生的危险因素而引起人们的关注。迄今为止，申请人已经研究了该细菌的致病因素，并发现该细菌特异性分泌的酪氨酰-tRNA合成酶(YARS)是一种诱导细胞产生炎性细胞因子和一氧化氮的新型试剂。已表明它是一种致病因素。在本研究中，我们研究了这样的假设：当咽峡炎沙门氏菌 YARS 因突变而变得具有高毒力时，它会成为上消化道的生物致癌因素。通过 PCR 对来自岩手医科大学分子微生物学系的健康个体和癌症患者的总共 8 个临床分离的咽峡炎沙门氏菌进行了扩增，其中 YARS 基因被扩增。纯化获得的PCR产物，并使用DNA测序比较源自健康个体的菌株和源自口腔癌的菌株的YARS核苷酸序列。结果，虽然来自健康个体的菌株和来自口腔癌的菌株的YARS核苷酸序列显示出超过98.7%的高同源性，但仅在来自口腔癌的菌株中发现了共同的氨基酸突变（位置；286, 304）、 384、 392）。我们还研究了分离临床分离株的培养方法，发现它们在使用乙酸调节至 pH 5.0 的 MS 琼脂培养基上生长。他们还发现，这种培养基抑制口腔链球菌的生长，但变形链球菌和远缘链球菌除外。未来，通过分析临床分离株的YARS序列并使用转基因生物检查其致病性，将揭示参与上消化道生物致癌的高致病性S. anginosus的存在。