Development of a new treatment method for repairing intestinal epithelial function of inflammatory bowel disease by human pulp MSC-conditioned medium

开发人牙髓间充质干细胞条件培养基修复炎症性肠病肠上皮功能的新治疗方法

基本信息

批准号：
22K08018
负责人：
大脇敏之
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tokyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08018/
关键词：
歯髄幹細胞培養上清炎症性腸疾患

项目摘要

2022年度は、炎症性腸疾患のモデルマウスであるデキストラン硫酸ナトリウム（DSS）誘導性腸炎マウスにおける不死化歯髄幹細胞培養上清（SHED-CM）の治療効果について検討を行った。① DSS腸炎マウスでの治療効果：C57BL/6マウスに3%DSSを1週間自由飲水させ、２日おきに計5回SHED-CMまたはコントロール培地を腹腔内投与すると、コントロール培地に比べ、SHED-CM投与により体重減少の回復が有意に早かった。10日後、腸組織の全長を比べると、SHED-CM投与により腸の長さが短くなり、粘膜固有層リンパ球のCellularityや細胞内サイトカインの発現解析により、特に抑制性の骨髄由来抑制細胞（MDSC）の割合が増加傾向にあった。次に、腸組織の細胞溶解液を調製し、腸組織の上皮バリアー機能を担う接着分子デスモグレイン2（DSG2）の発現をウエスタンブロットで調べると、SHED-CM投与により増加傾向にあった。② SHED-CMのサイトカイン網羅解析：SHED-CM中のサイトカイン量をRayBio 社のHuman Cytokine Antibody Arrayを用いて網羅的に定性発現解析を行うと、RANTES、Angiogenin、MMP-10、Osteoprotegerin、TIMP-2、HGF、MMP-1、TIMP-1という順で多かった。そこで、腸炎誘導への関与が報告されているマトリックスメタロプロテアーゼ（MMP）およびその阻害剤（TIMP）の腸での発現増強をRT-qPCR解析により調べると、SHED-CMとコントロール培地投与で有意な差は見られなかったが、発現の差は見られなくても、SHED-CM中のTIMP-1/2による腸粘膜でのMMP活性の抑制効果があるのではと、現在検討を続けている。

在2022财年，我们研究了永生化牙髓干细胞培养上清液（SHED-CM）对右旋糖酐硫酸钠（DSS）诱导的肠炎小鼠（炎症性肠病小鼠模型）的治疗效果。 ①对DSS肠炎小鼠的治疗效果：让C57BL/6小鼠随意饮用3%DSS一周，每两天腹腔注射5次SHED-CM或对照培养基，用CM减肥恢复明显更快。行政。 10天后，比较肠组织的总长度，发现由于给予SHED-CM，肠长度缩短，并且对固有层淋巴细胞的细胞结构和细胞内细胞因子的表达进行分析，发现骨髓来源的细胞因子抑制细胞（MDSC）的抑制性尤其明显，呈增加趋势。接下来，我们制备了肠道组织的细胞裂解物，并通过蛋白质印迹法检测了在肠道组织的上皮屏障功能中发挥作用的粘附分子桥粒芯糖蛋白2（DSG2）的表达。我们发现，随着时间的推移，表达量呈增加趋势。 SHED-CM 管理。 ② SHED-CM的细胞因子综合分析：利用RayBio人细胞因子抗体芯片对SHED-CM中细胞因子水平进行综合定性表达分析，结果显示RANTES、血管生成素、MMP-10、骨保护素、TIMP-2、HGF、MMP-1和TIMP-1 按此顺序最常见。因此，我们通过 RT-qPCR 分析研究了肠道中基质金属蛋白酶 (MMP) 及其抑制剂 (TIMP) 表达的增加，据报道它们与肠炎的诱导有关。目前正在研究 SHED-CM 中的 TIMP-1/2 是否可能对肠粘膜中的 MMP 活性具有抑制作用，即使没有观察到表达差异。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Potent antitumor effects of the conditioned medium of bone marrow-derived mesenchymal stem cells via IGFBP-4.

DOI：
10.1111/cas.15789
发表时间：
2023-06
期刊：
Cancer science
影响因子：
5.7
作者：
通讯作者：

Conditioned medium of immortalized stem cells from human exfoliated deciduous tooth exhibit protective effect on the peripheral neuropathy of experimental autoimmune neuritis.

人脱落乳牙永生干细胞条件培养基对实验性自身免疫性神经炎周围神经病变具有保护作用。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sakamoto E;Hasegawa H;Katahira Y;Miyakawa S;Watanabe A;Mizoguchi I;Yoshimoto T.
通讯作者：
Yoshimoto T.

Protective effects of conditioned media of immortalized stem cells from human exfoliated deciduous teeth on pressure ulcer formation.

DOI：
10.3389/fimmu.2022.1010700
发表时间：
2022
期刊：
FRONTIERS IN IMMUNOLOGY
影响因子：
7.3
作者：
Katahira, Yasuhiro;Murakami, Fumihiro;Inoue, Shinya;Miyakawa, Satomi;Sakamoto, Eri;Furusaka, Yuma;Watanabe, Aruma;Sekine, Ami;Kuroda, Masahiko;Hasegawa, Hideaki;Mizoguchi, Izuru;Yoshimoto, Takayuki
通讯作者：
Yoshimoto, Takayuki

Chemical- and Drug-Induced Allergic, Inflammatory, and Autoimmune Diseases Via Haptenation.