エネルギー代謝調節因子ＳＩＫ２／３がおよぼす炎症・免疫応答系の制御機構の解明

阐明能量代谢调节因子SIK2/3对炎症和免疫反应系统的控制机制

基本信息

批准号：
18J40240
负责人：
堀家なな緒
金额：
$ 2.33万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

骨や軟骨は、身体を支えたり、カルシウムを貯蔵するだけでなく、他臓器の間をつなぐ骨、軟骨生理活性物質（以下新規生理活性物質）を同定することは、エネルギー代謝・糖代謝の恒常性維持に関わる新たな機能解明につながり、人類の健康に関わる大きな発見となる。本研究では、ヒトiPS細胞由来軟骨組織を移植したマウスに様々な刺激をかけスクリーニングすることから、エネルギー代謝に重要な因子を軟骨・骨組織から同定する。SCIDマウスにヒトiPS細胞由来軟骨組織を移植し、レントゲンによる骨分化をモニタリングした。移植後3か月で十分に骨に分化しており、移植後9ヶ月の移植組織のHNA染色の結果、組織はヒト由来であることを確認した。しかしながら、移植マウスの血液の軟骨マーカーである既存のヒトⅡ型コラーゲン、ヒトコンドロカルシン、骨マーカーであるヒトオステオカルシンをマウスに交差性のない抗体を用いてELIZAで検討したが、移植マウスで、これらのマーカーの血中への分泌は確認できなかった。骨組織からこれらの分泌を促進するには、何らかの刺激や体内環境の変動が必要なため、この実験では、うまく検出できなかったと考察する。引き続き、移植マウスに高脂肪食を負荷、インスリン、PTHrP製剤刺激を行い、血液サンプルを採取している。負荷刺激マウスと対照マウスの血漿をLC-MS/MS 型質量分析装置にかけ、ヒトアミノ酸配列のデータベース上の遺伝子と一致するタンパク質を探索することで、新規分泌因子Xの同定を行う。エネルギー代謝に関連する軟骨・骨組織由来の特別な分泌タンパク質が同定できる可能性が高いと考える。

识别骨骼和软骨不仅支持身体和存储钙，而且还将其他器官与骨骼和软骨生理活性物质（以下称为新型生理活性物质）连接起来，将导致阐明与维持能量和gl糖剂的稳态相关的新功能，使其与人类的健康相关。在这项研究中，将各种刺激应用于已植入人IPS细胞衍生的软骨组织的小鼠，并且将从软骨和骨组织中鉴定出对能量代谢重要的因素。将人IPS细胞衍生的软骨组织植入SCID小鼠，并通过X射线监测骨分化。植入三个月后，将组织足够分化为骨骼，植入后9个月植入组织的HNA染色证实了组织是人的起源。然而，现有的人类II型胶原蛋白，人软骨素和移植小鼠的骨标记使用小鼠中的非交叉抗体检查了移植的小鼠，但是在移植的小鼠中无法确认这些标记物为血液的分泌。我们认为该实验无法检测到这一点，因为需要在身体环境中进行某些刺激或变异来促进骨组织的分泌。随后，将移植的小鼠加载高脂饮食，并用胰岛素和PTHRP制剂刺激，并收集血液样本。负载刺激和对照小鼠的血浆受到LC-MS/MS类型质谱仪的搜索，以搜索与人类氨基酸序列数据库中基因相匹配的蛋白质，从而鉴定出新的分泌因子X。很有可能是特殊的分泌蛋白来自软骨和骨组织的特殊分泌蛋白可以与能量代理相关。