Studies on the effect of chromosomal differentiation and cytoplasmic bacteria on speciation process in grasshoppers

蝗虫染色体分化和细胞质细菌对物种形成过程影响的研究

基本信息

批准号：
17F15762
负责人：
立田晴記
金额：
$ 0.7万
依托单位：
University of the Ryukyus
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17F15762/
关键词：
フキバッタ染色体生殖隔離 FISH Wolbachia 系統ミトコンドリア

项目摘要

２０１７年度は研究用標本の追加採集，核型分析，およびミトコンドリア・核遺伝子の塩基配列分析，系統樹構築，論文執筆をおこなった．まず標本採集については，７月下旬から８月初旬にかけて，北海道東部，中央部に分布するサッポロフキバッタ成虫を複数個体群から採集した．特に染色体の分析をおこなうため，異なる核型（通常型と転座・逆位型）を持つ地域を予め選定しておき，集中的に採集をおこなった．また昨年度までに得られた標本をあわせ，Yao et al. (1996)で開発されたマイクロサテライト遺伝子（６遺伝子）の遺伝子型の判読を実施した．論文に記載されている条件で標的遺伝子を蛍光プライマーを使って増幅後，電気泳動にて増幅チェックをおこなった．その後キャピラリー式DNAアナライザーを用いて増幅産物の長さを判定し，対立遺伝子データを取得した．得られたデータについては景観遺伝学・集団遺伝学的解析を進めている．また日本産フキバッタ族昆虫で，これまで核型に関する情報が全く得られていない種を対象に，蛍光in situハイブリダイゼーションよる特異的塩基配列の検出，バンド染色法による染色体の比較観察をおこない，論文にまとめて専門誌に投稿した．論文は受理され，オンライン出版された(Grzywacz et al. 2018　業績欄を参照）．ミトコンドリアと核遺伝子の分析については追加採集された標本を対象に複数遺伝子座について増幅をおこない，塩基配列を解読，比較した．また形態形質の進化についても論じるため，外部形態と生殖器の形質状態をスコアリングし，作成される分子系統樹とあわせて分析する準備を進めた．またWolbachiaの感染については，専門家と一緒に感染有無の確認をおこなった．

在2017财年，收集了其他研究标本，核分析和米特罗斯特里亚 /核基因分子分析，谱系结构和写作论文。首先，收集标本是从北海道东部分发的多个单独的sapporo kattatto成年人组中收集的，从7月下旬到8月初。特别是，为了分析染色体，我们提前选择了具有不同核（正常类型和过渡，反向类型）的区域，并深入收集。通过去年获得的标本合并，并在Yao等人（1996年）中开发了微骨基因的基因（6基因）。在论文中描述的条件下，通过使用荧光底漆来通过电动游泳来检查靶基因。之后，使用资本DNA分析仪确定放大产物的长度，并获得了相反的基因数据。对于获得的数据，正在促进景观基因和集体遗传分析。此外，迄今为止，日本蓬松的蚱虫昆虫尚未获得有关核类型的信息，并且使用带染色的方法比较染色体，以检测特定的碱基序列，因为荧光原位杂交并比较了染色体。本文被接受并在线发表（请参阅Grzywacz等人，2018年业务栏）。将线粒体和核基因的分析放大，以进行其他收集的样品，并进行了解密并比较基础序列。此外，为了讨论形式的演变，我们准备对外部形式和生殖器官的状态进行评分，并与所产生的分子树一起分析。关于沃尔巴奇的感染，专家证实了感染的存在或不存在。