bHLH型転写因子Dec1による制御性T細胞の新規維持機構の解明

bHLH 转录因子 Dec1 阐明调节性 T 细胞的新型维持机制

• 批准号: 21790278
• 负责人: 宮崎 和子
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21790278/
• 关键词: 制御性T細胞; 転写因子

我々はbasic helix-loop-helix (bHLH)型写因子であるDec1がT細胞の分化・増殖および活性化の制御において重要な役割を果たすことを見出した。Dec1による転写制御は制御性T細胞の量的・機能的維持に必須であるという新しい局面を提唱し、その分子機構の解明のために研究を遂行して、本年度は以下の結果を得た。1. 野生型、Dec1 KOの末梢リンパ組織より、制御性T (Treg)細胞を単離し、effector T cellとともにRag1 KOマウスに移入し、時間的経過を観察した。その結果、Dec1 KOのTregを移入した方が、野生型を移入したものより、Treg細胞数が減少していた。よって、Dec1はin vivoにおいてTregの維持に必要であることを明らかにした。2. Dec1の標的遺伝子候補としてCD25を見いだし、CD25遺伝子の転写制御領域においてChIPアッセイを行った。その結果、Dec1が結合する領域が2カ所あり、Dec1はCD25遺伝子を標的遺伝子とすることを明らかにした。3. CD25遺伝子座におけるDec1結合領域の1つは、Runx1によるCD25遺伝子調節領域と一致していたことから、Dec1にはRunx1との結合能がある前能性が考えられた。そこで、野生型とDec1 KOのTregを単離し、ChIPアッセイおよび免疫染色を行った。その結果、Tregにおいて、Dec1とRunx1が結合することを明らかにし、Dec1はRunx1と結合して協調的にCD25遺伝子発現を調節していることが示唆された。以上のことから、Dec1による転写制御は制御性T細胞の維持機構に必須であり、その分子機構として、Dec1はRunx1と協調してCD25遺伝子発言調節を行っていることを示した。これまでの成果と以上の結果を合わせて、現在論文投稿中である。

我们发现Dec1是一种碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）型转录因子，在调节T细胞分化、增殖和激活中发挥重要作用。我们提出了Dec1的转录控制对于调节性T细胞的数量和功能维持至关重要的新观点，并开展了阐明其分子机制的研究，今年获得了以下结果。 1.从野生型和Dec1 KO小鼠的外周淋巴组织中分离调节性T（Treg）细胞，与效应T细胞一起转入Rag1 KO小鼠体内，观察时程。结果，当Dec1 KO Tregs被转移时，Treg细胞的数量比当野生型细胞被转移时减少。因此，表明Dec1对于体内Tregs的维持是必需的。 2.发现CD25作为Dec1的候选靶基因，并对CD25基因的转录调控区进行ChIP分析。结果显示，Dec1 结合了两个区域，并且 Dec1 靶向 CD25 基因。 3. CD25基因位点上的Dec1结合区之一与Runx1的CD25基因调控区重合，表明Dec1具有与Runx1结合的能力。因此，分离野生型和 Dec1 KO Tregs 并进行 ChIP 测定和免疫染色。结果显示Dec1和Runx1在Tregs中相互作用，表明Dec1与Runx1结合并协调调节CD25基因表达。综上所述，我们证明了Dec1的转录控制对于调节性T细胞的维持机制至关重要，并且Dec1与Runx1协同调节CD25基因表达是一种分子机制。目前正在根据迄今为止获得的结果和上述结果提交一篇论文。