頭部神経堤の分化運命決定におけるＡＦ１０－Ｄｏｔ１ＬによるＨ３Ｋ７９ｍｅ機能解析

AF10-Dot1L 分析 H3K79me 功能决定头部神经嵴分化命运

• 批准号: 16J02655
• 负责人: 小河 穂波
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: University of Miyazaki (2017)Nara Women's University (2016)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J02655/
• 关键词: 神経堤細胞; エピジェネティクス; H3K79メチル化; 顔面発生; Mllt10; Af10; Dot1L

H28年度に、Af10ホモ変異胚の顔面正中の融合不全が鼻の原基（鼻隆起）内の神経堤細胞の増殖低下が一因であることが分かったが、Af10-Dot1L複合体が直接制御する遺伝子と、顔面正中の融合不全の原因となる神経堤細胞以外の組織に関しては不明であった。これをうけ、H29年度に以下の2点について解析し、論文（Ogoh H., et al., Scientific Reports, 2017）にした。（1）Af10-Dot1l複合体がAP2α遺伝子の発現制御を直接行っているかを調べるため、胎生10.5日目のAf10ホモ変異胚の鼻隆起を含む組織を用いてクロマチン免疫沈降を行った。その結果、Af10ホモ変異胚のAP2α遺伝子のプロモーター、エンハンサー、コーディング領域でH3K79メチル化の著しい減少が確認された。（2）胎生12.5日目のAf10ホモ変異胚の前脳の神経上皮で細胞増殖が増加していることから、神経前駆細胞の増殖異常が示唆された。胎生12.5日目のAf10ホモ変異胚の前脳では、両側の内側基底核隆起間の幅が広がり、内側基底核隆起と外側基底核隆起の境界が曖昧となっていた。この表現型は、頭部が外側へ拡がる表現型（ハイパーテルリズム）を示すマウスモデルで見られる。このことから、Af10ホモ変異胚では前脳の神経上皮にある神経前駆細胞の増殖異常により、ハイパーテロリズムを生じ、顔面正中の融合不全の一因なっている可能性が示唆された。以上の内容から以下の論部を投稿し、採択された。Mllt10 knockout mouse model reveal critical role of Af10-dependent H3K79 methylation in midfacial development. Ogoh H., et al., Sci Rep. 2017

2016财年，人们发现Af10纯合胚胎中面部中线融合失败是由于鼻原基（鼻突起）内神经嵴细胞增殖减少引起的，而这种增殖是由Af10-Dot1L复合物直接调控的。导致中线面部融合的神经嵴细胞和神经嵴细胞以外的组织尚不清楚。针对这一点，我们在2017财年分析了以下两点，并发表了一篇论文（Ogoh H., et al., Scientific Reports, 2017）。 (1)为了研究Af10-Dot1l复合物是否直接调节AP2α基因的表达，我们在胚胎第10.5天使用含有Af10纯合突变体胚胎鼻突出的组织进行染色质免疫沉淀。结果证实，Af10纯合胚胎中AP2α基因的启动子、增强子和编码区的H3K79甲基化显着降低。 (2)Af10纯合突变体胚胎在胚胎第12.5天前脑神经上皮细胞增殖增加，提示神经祖细胞增殖异常。在胚胎12.5天的Af10纯合突变体胚胎的前脑中，两侧内侧基底节脊之间的宽度增加，并且内侧基底节脊和外侧基底节脊之间的界限变得模糊。这种表型可见于表现出头部向外扩张（hypertellism）的小鼠模型。这些结果表明，在Af10纯合胚胎中，前脑神经上皮中神经祖细胞的异常增殖导致距离过远，这可能是面部中线融合失败的一个促成因素。基于以上内容，我提交了以下论文并被接受。 Mllt10 敲除小鼠模型揭示了 Af10 依赖性 H3K79 甲基化在中面部发育中的关键作用 Ogoh H. 等人，Sci Rep. 2017。

项目成果

顔面発生におけるH3K79メチル化の機能

H3K79甲基化在面部发育中的作用

• 发表时间: 2016
• 作者: 沖 啓輔;山上 健;永田麻梨子;高島夏希;真柳浩太;白井 剛;石野園子;石野良純;小河 穂波
• 通讯作者: 小河 穂波

顔面形成におけるAf10を介したH3K79meの機能

H3K79me 通过 AF10 在面部形成中的作用

• 发表时间: 2017
• 作者: Mariko Nagata;Sonoko Ishino;Takeshi Yamagami;Jan-Robert Simons,Tamotsu Kanai;Haruyuki Atomi;and Yoshizumi Ishino.;小河穂波
• 通讯作者: 小河穂波

KU Leuven Univercity(Belgium)

鲁汶大学（比利时）

Af10 regulates mid facial development via H3K79 methylation

AF10 通过 H3K79 甲基化调节中面部发育

• 发表时间: 2018
• 作者: Wu;L. J.;Higashimori;A.;Qin;Y.;Hojo;T.;Kubota;K.;& Li;Y. Y.;Honami Ogoh
• 通讯作者: Honami Ogoh