肺炎レンサ球菌による血液脳関門突破機構の解明

肺炎链球菌突破血脑屏障机制的阐明

• 批准号: 16J02607
• 负责人: 広瀬 雄二郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J02607/
• 关键词: 肺炎レンサ球菌; 血液脳関門突破機構; 付着率; 侵入率; Ccs4

肺炎レンサ球菌は，肺炎や髄膜炎の主たる原因菌である．本菌が産生するcompetence induced protein Ccs4は形質転換誘導性タンパク質の一つとして報告されているが，病態発症における役割は未だ不明である．本年度の研究では，Ccs4が肺炎レンサ球菌の病原性に果たす役割を解析した．肺炎レンサ球菌TIGR4株を親株としてccs4欠失株を作製した．ccs4欠失変異株にプラスミドpDCermを用いてCcs4を再導入し相補株を得た．Ccs4が宿主の殺菌機構への抵抗性に寄与するかを調べるため，各菌株とマウス血液を混和し，培養後の菌体生存率を算定した．また，抗菌ペプチドLL-37に対する感受性試験を行った．次に，ヒト脳微小血管内皮細胞へ各菌株を感染させ，付着率と侵入率を算定した．さらに，マウスの尾静脈から各菌株を感染させ，感染後のマウスの生存時間を比較した．各菌株間で，マウス血液中の生存率，およびLL-37による最小発育阻止濃度及び最小殺菌濃度に差は認められなかった．その一方で，ヒト脳微小血管内皮細胞へのccs4欠失変異株の付着率と侵入率は，野生株および相補株と比較して有意に低下した．マウス静脈感染実験の結果から，ccs4欠失変異株感染マウスの生存時間は，野生株感染マウスと比較して有意に延長した．また、マウス静脈感染後24時間の血液中の細菌数は野生株感染マウスとccs4欠失株感染マウスで検出に差は見られなかったが、脳内の菌数においては、ccs4欠失株感染マウスでの検出数が有意に低下した。以上の結果より，肺炎レンサ球菌のCcs4は，自然免疫による殺菌からの回避には寄与せず，脳微小血管内皮細胞への付着および侵入に関与し，病原因子として働く可能性が示された．

肺炎Lensor的葡萄球菌是肺炎和脑膜炎的主要原因。该细菌产生的能力诱导的蛋白CCS4据报道是转化的诱导蛋白质之一，但在病理学中的作用仍然未知。在今年的研究中，我们分析了CCS4在肺炎镜片的致病性中的作用。 CCS4丢失的股票是使用肺炎伦森链球菌TIGR4股份作为父股创建的。 CCS4是针对损失异常库存的CCS4缺失的重新引入的，并获得了相位份额。为了检查CCS4是否有助于宿主对灭菌机制的抗性，将细菌菌株和小鼠血液混合在一起，并计算培养后的细菌存活率。另外，对抗菌肽LL-37进行了灵敏度测试。接下来，将每个细菌菌株感染到人脑微叶的内皮细胞中，并计算了粘附率和侵入率。此外，每个细菌都是从小鼠的尾部感染的，并比较了感染后小鼠的存活时间。小鼠血液的存活率，小鼠血液的最小发育与每个细菌的最小灭菌浓度之间没有差异。另一方面，与野生和互补份相比，CCS4的粘附和侵袭率对人脑微育内皮细胞的粘附和侵袭率显着降低。根据小鼠静脉感染实验的结果，与野生库存感染小鼠相比，CCS4缺失菌株感染小鼠的存活时间显着扩展。此外，小鼠静脉感染后24小时血液中的细菌数量在检测野生库存感染小鼠和CCS4损失的库存感染小鼠方面没有差异，而是大脑中的细菌数量，CCS4损失了库存感染。小鼠中的检测数量显着减少。从上述结果中，CCS4（一种肺炎镜头）并没有促进自然免疫引起的灭菌，但可能参与粘附和侵入脑 - 微生物 - 微生物血管内皮细胞，并且可能是一种引起诱因。

项目成果

肺炎球菌が発現する形質転換誘導性タンパク質Ccs4の病原性への関与

肺炎球菌表达的转化诱导蛋白 Ccs4 参与致病性

• 发表时间: 2016
• 作者: 広瀬雄二郎;山口雅也;後藤花奈;住友倫子;中田匡宣;川端重忠
• 通讯作者: 川端重忠