セントロメアＲＮＡ－タンパク質複合体による染色体分離制御機構の解析

着丝粒RNA-蛋白质复合物染色体分离控制机制分析

基本信息

批准号：
16J01336
负责人：
長裕紀子
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J01336/
关键词：
非コードRNA 染色体分離セントロメアコヒーシン Non-coding RNA RNP

项目摘要

本研究では、細胞分裂における染色体分離過程の詳細なメカニズム解明を目的とし、セントロメア由来非コードRNA（セントロメアRNA）の機能解析を行ってきた。昨年度までに、セントロメアRNAが細胞周期依存的なRNP複合体形成を通じて、正確な染色体分離を制御している可能性を見出していた。本年度はまず、「年次計画①：間期RNP複合体の意義解明」を目的とし、間期複合体因子DHX38とセントロメアRNA、または分裂期複合体因子RBMXの関係について解析を行った。その結果、間期RNP複合体は、セントロメアRNAおよび分裂期複合体の量やクロマチン局在には影響を与えないことを明らかにした。次に、「年次計画②：コヒーシン制御モデルの検証」を目的として、分裂期複合体因子として既に同定済みのAurora BとRBMXに注目した。各因子が形成する2種の複合体の関係について解析を試み、それぞれが別々の複合体を形成するにも関わらず、RBMXがAurora Bのセントロメア局在とキナーゼ活性に重要であるという興味深い結果を得た。また、セントロメアRNAがRBMXとコヒーシン制御因子Sororinのタンパク質量維持に関与する一方で、セントロメアコヒーシン保護因子Sgo1のタンパク質はその量の維持にセントロメアRNAを必要とせず、セントロメアRNAが特異的な制御を示すことが明らかとなった。さらに、セントロメアRNAがRBMXのクロマチン局在制御には関与しないこと、SororinもセントロメアRNAと同じくRBMXタンパク質量維持に重要であることを見出し、セントロメアRNAによるコヒーシン制御を介した染色体分離機構の詳細について初めて明らかにした。年次計画②の解析結果については、RBMXを含むセントロメアRNP複合体による染色体分離制御機構としてGenes to Cell誌に報告した。

这项研究旨在阐明细胞分裂过程中染色体分离过程的详细机制，并对丝粒衍生的非编码RNA（Centromeric RNA）进行了功能分析。到去年，它已经发现CencerRomeric RNA可以通过依赖细胞周期的RNP复合物形成来调节准确的染色体分离。今年，我们首先分析了相间复杂因子DHX38，丝粒RNA或有丝分裂复合物因子RBMX之间的关系，其目的是“年度计划1：阐明中相RNP复合物的重要性”。结果表明，间相RNP复合物对丝粒RNA和有丝分裂复合物或染色质定位没有影响。接下来，以“年度计划2：粘连控制模型的验证”的目的，我们专注于Aurora B和RBMX，这些Aurora B和RBMX已被确定为有丝分裂复杂因子。我们试图分析每个因素形成的两个复合物之间的关系，发现RBMX对于Aurora B Cendromeric定位和激酶活性至关重要，尽管每个复合物都形成了单独的复合物。还已经表明，尽管中心粒RNA参与维持RBMX的蛋白质含量和粘蛋白调节蛋白索洛蛋白，但丝粒粘着蛋白保护因子SGO1的蛋白质不需要中心层面RNA来维持其量，并且CencerRomeric RNA表现出特定的控制。此外，我们发现CencerRomeric RNA不参与RBMX染色质定位的调节，而Sororin对于维持RBMX蛋白的量很重要，就像CencerRomeric RNA一样，我们第一次揭示了通过集中层rna ramomoseric rna的染色体分离机制的细节。年度计划2的分析结果是在基因中向细胞中报告的，作为控制含有RBMX的丝粒RNP复合物控制染色体分离的机制。