中枢神経系と筋細胞におけるGnRHの新奇な生理機能

GnRH 在中枢神经系统和肌肉细胞中的新生理功能

基本信息

批准号：
20657018
负责人：
日下部岳広
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Konan University (2009)University of Hyogo (2008)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20657018/
关键词：
GnRH 脳・神経生殖筋肉行動発生

项目摘要

(1)GnRH/GnRH受容体を発現する細胞の同定:昨年に引き続き、各種細胞マーカーとの二重染色実験により、GnRHおよびGnRH受容体を発現する細胞の種類や形態、シナプス標的を解析した。カタユウレイボヤの2つのGnRH前駆体遺伝子(Ci-gnrh1、Ci-gnrh2)は幼生の神経系(付着突起、グルタミン酸作動性表皮ニューロンの一部、脳胞、運動神経節、神経索)で特異的に発現する。Ci-GnRHR1およびCi-GnRHR2が尾部筋肉細胞で発現することに加え、Ci-GnRHR2が尾部表皮神経細胞で発現すること、Ci-GnRHR3が尾部脊索細胞で発現することを見出し、GnRHがホヤ幼生の尾部において新奇な役割をもつことを示す新しい証拠を得た。(2)ホヤ幼生へのGnRH投与実験:ホヤ幼生にGnRHを投与する実験により、GnRHが変態の制御に関わる可能性が示唆された。(3)遺伝子ノックダウン法によるGnRH系の生理機能の解析:ホヤGnRH前駆体遺伝子に対するアンチセンスモルフォリノオリゴ(MO)をホヤ卵に顕微注入することにより、GnRHの機能阻害を試みた。Ci-gnrh2に対するアンチセンスMOを注入したホヤ胚では、初期胚の発生異常がみられ、GnRHが発生初期にも何らかの生理機能をもつ可能性が示唆された。(4)脊椎動物におけるGnRHの新奇機能の解析:メダカをモデル生物として、ホヤで見出されたGnRHの神経索での発現に類似の現象の解析に着手した。

(1)表达GnRH/GnRH受体的细胞鉴定：继去年之后，我们通过各种细胞标记物的双染实验，分析了表达GnRH和GnRH受体的细胞的类型、形态和突触靶点。海鞘中的两个 GnRH 前体基因（Ci-gnrh1 和 Ci-gnrh2）在幼虫神经系统（附件、部分谷氨酸表皮神经元、脑泡、运动神经节和神经索）中特异性表达。除了Ci-GnRHR1和Ci-GnRHR2在尾部肌肉细胞中表达外，我们还发现Ci-GnRHR2在尾部表皮神经细胞中表达，Ci-GnRHR3在尾部脊索细胞中表达，我们获得了新的证据。尾巴有一个新的作用。 (2)对海鞘幼虫施用GnRH的实验：对海鞘幼虫施用GnRH的实验表明GnRH可能参与变态的控制。 (3)通过基因敲低法分析GnRH系统的生理功能：我们尝试通过将针对海鞘GnRH前体基因的反义吗啉寡核苷酸(MO)显微注射到海鞘卵中来抑制GnRH的功能。在注射了针对Ci-gnrh2的反义MO的海鞘胚胎中，观察到早期胚胎发育异常，这表明GnRH即使在早期发育中也可能具有某些生理功能。 (4)GnRH在脊椎动物中的新功能分析：以青鳉作为模式生物，我们开始分析类似于海鞘神经索中GnRH表达的现象。