核多角体病ウイルス感染昆虫細胞におけるＲＮＡ分解による生体防御の分子機構

核型多角体病毒感染昆虫细胞RNA降解生物防御的分子机制

基本信息

批准号：
15J02649
负责人：
浜島りな
金额：
$ 1.39万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本課題は, 核多角体病ウイルス (NPV) 感染に対して昆虫細胞が誘導するRNA分解の機構を分子レベルで明らかにすることを目的としている. 本年度は, 以下の2つを中心に研究を行った.①NPV感染昆虫細胞が誘導するRNA分解の進化的保存性NPV感染に伴うRNA分解は他のチョウ目昆虫において認められないことから, カイコ細胞に特異的な応答であると考えられた. そこで, カイコの祖先種と考えられるカイコガ科のクワコ細胞, カイコに近縁なヤママユガ科のサクサン細胞を用いて, NPV感染に伴うRNA分解誘導の有無について調査した. その結果, クワコ細胞はNPV感染に伴ってRNA分解を誘導することが示された. 一方, サクサン細胞はRNA分解を誘導しなかった. これらの結果から, 非許容性NPV感染に伴うRNA分解誘導はカイコガ科昆虫に特異的な応答であることが示唆された.②カイコ細胞のRNA分解とアポトーシス誘導に関与するNPV因子 (P143) の機能解析これまでに, 非許容性NPVのP143の一過性発現によりカイコ細胞がRNA分解とアポトーシスを誘導することを示した. そこで, P143のアポトーシス誘導に関わる機能の解明を目的として, RNA分解誘導に関与するScH領域をBmNPVのP143 (Bm-P143) のものと組換えたAcMNPVのP143 (Ac-P143) 変異体の一過性発現解析を行った. その結果, ScH領域がアポトーシス誘導にも関与することが示された. さらに, ScH領域のアミノ酸残基をBm-P143のものと組換えたAc-P143変異体を用いた解析を行った結果, RNA分解誘導に関与する8アミノ酸残基がアポトーシス誘導にも関与することが示された. これらの結果から, カイコ細胞が誘導するRNA分解とアポトーシスは密接に関連していることが示唆された.

该项目的目的是在分子水平上阐明昆虫细胞响应核多角体病毒（NPV）感染而诱导RNA降解的机制。今年，我们的研究将集中在以下两个领域（1）进化保守。 NPV 感染的昆虫细胞诱导的 RNA 降解由于在其他鳞翅目昆虫中没有观察到与 NPV 感染相关的 RNA 降解，因此认为这是蚕细胞特有的反应。我们使用家蚕科（被认为是蚕的祖先物种）的栎属细胞和与蚕密切相关的丝科科的 Saxan 细胞，研究了是否存在或不存在针对 NPV 感染诱导的 RNA 降解诱导。另一方面，Saxan 细胞没有诱导 RNA 降解。与非允许性NPV感染相关的RNA降解诱导被认为是家蚕昆虫特有的反应。，一种非允许性 NPV，会诱导家蚕细胞中的 RNA 降解和细胞凋亡。因此，我们的目的是阐明 P143 与细胞凋亡诱导相关的功能。我们对AcMNPV P143（Ac-P143）突变体进行瞬时表达分析，其中参与RNA降解诱导的ScH区域与BmNPV P143（Bm-P143）的重组，结果发现ScH区域参与其中。此外，使用ScH区的氨基酸残基与Bm-P143的氨基酸残基重组的Ac-P143突变体进行分析，结果显示其也参与诱导。参与诱导RNA降解的8个氨基酸残基也被证明参与诱导细胞凋亡。这些结果表明，蚕细胞诱导的RNA降解与细胞凋亡密切相关。