PTK7による平面内細胞極性形成機構とその形態形成における役割の解析

PTK7平面内细胞极性形成机制及其在形态发生中的作用分析

基本信息

批准号：
08J05257
负责人：
迫圭輔
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J05257/
关键词：
平面内細胞極初期発生ゼブラフィッシュ PTK7 Wnt 平面内細胞極性

项目摘要

本年度は、受容体型チロシンキナーゼ様分子PTK7が初期発生の形態形成に必要な平面内細胞極性(頂部基部軸に直交する平面内に発達する細胞極性)を形成する分子メカニズムを明らかにするため、以下の実験を行った。1.昨年度我々は、PTK7は細胞外領域を介してGalectin-1と会合することを明らかにした。PTK7による細胞間接着制御にGalectin-1が関与しているか知るため、Galectin-1ノックダウン細胞を用いて接着実験を行った。その結果、PTK7による接着制御にGalectin-1は関与していないことが分かった。2.PTK7の初期発生過程における役割を知るために、ゼブラフィッシュ胚を用いた実験を行った。モルフォリノを用いてPTK7をノックダウンした結果、前後軸の伸長が抑制されるフェノタイプが得られた。原腸陥入時にprechordal mesodermをcaged化合物で標識しタイムラプス観察を行った結果、prechordal plateのanimal poleへの移動が抑制されていることが分かった。昨年度我々はPTK7が細胞内領域を介してPrickle1と会合することを明らかにしている。PTK7とPrickle1の相互作用が体軸伸長に関与しているか知るために、低濃度の各モルフォリノを用いたノックダウン実験を行った。その結果、PTK7とPrickle1のノックダウンによりフェノタイプがわずかに増強されることが明らかとなった。以上の結果から、PTK7は初期発生においてPrickle1と相互作用し体軸伸長に関与している可能性が示唆された。

今年，我们将研究受体酪氨酸激酶样分子PTK7形成早期发育形态发生所需的面内细胞极性（在垂直于顶底轴的平面上发育的细胞极性）的分子机制进行实验。进行了。 1. 去年，我们发现PTK7通过细胞外区域与Galectin-1结合。为了确定Galectin-1是否参与PTK7对细胞间粘附的调节，我们使用Galectin-1敲低细胞进行粘附实验。结果发现Galectin-1不参与PTK7的粘附控制。 2.为了了解PTK7在早期发育过程中的作用，我们利用斑马鱼胚胎进行了实验。使用吗啉敲低PTK7的结果，获得了前后轴伸长受到抑制的表型。通过对原肠胚形成过程中用笼状化合物标记的脊索前中胚层进行延时观察，我们发现脊索前板向动物极的运动受到抑制。去年，我们发现 PTK7 通过细胞内区域与 Prickle1 结合。为了确定 PTK7 和 Prickle1 之间的相互作用是否参与体轴伸长，我们使用低浓度的每种吗啉进行了敲低实验。结果显示，PTK7 和 Prickle1 的敲低略微增强了表型。这些结果表明 PTK7 在早期发育过程中与 Prickle1 相互作用，并可能参与体轴伸长。