骨延長モデルを用いた間葉系幹細胞集積に関する研究

利用骨延长模型研究间充质干细胞聚集

• 批准号: 24792200
• 负责人: 藤尾 正人
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24792200/
• 关键词: 間葉系幹細胞; 骨延長

はじめに、申請者らが解析対象としてきたマウス骨延長モデルを用いて、間葉系幹細胞の局在解析に取り組んだ。具体的な手法として、間葉系幹細胞を同定するための特異的抗原(Sca-1, CD44, CD45, CD31, PDGFレセプターα,Nestinなど)を数種類組み合わせた免疫染色を経時的に行った。延長終了時の骨延長部のサンプルでは間葉系幹細胞が延長部に集積している像を得た。また、延長部の組織を取り出し、コラゲナーゼ、ディスパーゼで処理した後に間葉系幹細胞培地を用いて培養を試みた。培養された細胞は一般的な間葉系幹細胞の性質である多分化能(骨、軟骨、脂肪組織への分化能)を有していた。また、形態学的にも繊維芽細胞様の細胞であった。以上のことから、マウス骨延長治癒過程に置いて内在性の間葉系幹細胞は延長部に集積し、骨、軟骨再生に寄与していることが示唆された。細胞移植治療はこれまで治癒が困難であった大型組織欠損の再生を実現しうる可能性を持っている。しかし、細胞移植治療には多くの問題点も残されているのも事実である。細胞培養のための時間と経費、細胞品質の安定性の問題、移植後の腫瘍化、細胞採取に伴う侵襲などが挙げられる。これらの問題は、細胞を体内から取り出し、培養するため起こる問題である。そのため、もし内在性幹細胞の移動をコントロールすることができれば、再生医療は新しいステージへと進むことができる。今後の解析では、同モデルを用いて間葉系幹細胞の集積因子の解析を行う。

首先，我们尝试使用我们分析过的小鼠骨延长模型来分析间充质干细胞的定位。作为具体方法，我们使用几种特异性抗原（Sca-1、CD44、CD45、CD31、PDGF受体α、Nestin等）的组合进行随时间的免疫染色来鉴定间充质干细胞。在延长结束时的骨延长部的样品中，获得了间充质干细胞聚集在延长部中的图像。我们还从延伸物中取出组织，用胶原酶和分散酶对其进行处理，然后尝试使用间充质干细胞培养基对其进行培养。培养的细胞具有多能性（分化为骨、软骨和脂肪组织的能力），这是一般间充质干细胞的特性。此外，这些细胞在形态上类似于成纤维细胞。综上所述，表明内源性间充质干细胞在延长的骨延伸中积累，并在小鼠骨延长和愈合过程中有助于骨和软骨的再生。细胞移植疗法有可能使难以治愈的大组织缺陷再生。然而，细胞移植疗法也确实存在许多问题。这些包括细胞培养的时间和费用、细胞质量稳定性问题、移植后肿瘤形成以及与细胞收集相关的侵袭。这些问题的出现是因为细胞被从体内取出并进行培养。因此，如果我们能够控制内源性干细胞的迁移，再生医学就能前进到一个新的阶段。在以后的分析中，我们将使用相同的模型来分析间充质干细胞的积累因素。