糖尿病歯髄の病的石灰化および炎症反応に及ぼす最終糖化産物（ＡＧＥｓ）の影響

晚期糖基化终末产物（AGEs）对糖尿病牙髓病理钙化和炎症反应的影响

基本信息

批准号：
24592869
负责人：
稲垣裕司
金额：
$ 3.33万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24592869/
关键词：
糖尿病歯髄病的石灰化最終糖化産物 AGE RAGE S100タンパク MAPK 歯髄細胞炎症 S100A8 S100A9

项目摘要

【研究目的】動脈硬化巣などの病的石灰化部位ではAGEの蓄積によりS100A8/A9，IL-1βなどの炎症性マーカーの発現が亢進していることが報告されている。このことから歯髄組織でもAGEが石灰化のみならず炎症反応に影響を与えている可能性が考えられたため，平成25年度に糖尿病ラットの歯髄組織における炎症性マーカーの発現と，培養歯髄細胞の炎症性マーカー発現に及ぼすAGEの影響について検討した。その結果，糖尿病ラットの歯髄では健常ラットと比較して炎症性マーカーのmRNA発現が高く，さらに培養歯髄細胞にAGEを添加するとS100A8/A9やIL-1βなどの炎症性マーカーの発現が増強した。本年度は糖尿病歯髄の病的石灰化および炎症反応亢進のメカニズムを検証するために，抗RAGE抗体やMAPK阻害剤を用いてAGEの作用機序を調べた。【材料および方法】歯髄細胞は雄性Wistar系ラットの上顎切歯より採取し，AGEを50～1000μg/mlの濃度で添加して細胞培養を行った。AGEはBSAとグリセルアルデヒドを用いて作製した。そして抗RAGE抗体やMAPK阻害剤（PD98059，SB203580, SP600125）を加え，経時的にRNAを採取・抽出し，石灰化関連マーカーと炎症性マーカーについてRT-PCR，real-time PCRを行った。【結果】AGEを添加した培養歯髄細胞に抗RAGE抗体やMAPK阻害剤を添加すると，AGE添加により増加したOCNやS100A8/A9の発現は有意に低下した。このことからAGE添加による培養歯髄細胞の石灰化や炎症反応亢進にはRAGEおよびMAPK経路が関連していることが示された。【結論】糖尿病の歯髄組織ではAGE誘導性に病的石灰化および炎症反応亢進が引き起こされており，これはRAGE-MAPK経路を介している可能性が示された。

[研究目的] 有报道称，由于AGEs的积累，动脉硬化病变等病理钙化部位的S100A8/A9、IL-1β等炎症标志物表达增加。这表明AGEs可能不仅影响钙化，还影响牙髓组织的炎症反应，因此，2013年，我们研究了糖尿病大鼠牙髓组织中炎症标志物的表达以及培养牙髓细胞的炎症反应。 AGE 对性标记表达的影响。结果显示，糖尿病大鼠牙髓中炎症标志物mRNA表达量高于健康大鼠，且培养牙髓细胞中添加AGE可增强S100A8/A9、IL-1β等炎症标志物的表达。今年，为了验证糖尿病牙髓病理性钙化和高炎症反应的机制，我们使用抗RAGE抗体和MAPK抑制剂研究了AGE的作用机制。 [材料和方法] 从雄性Wistar大鼠的上颌切牙采集牙髓细胞，并以50至1000μg/ml的浓度添加AGE进行培养。 AGE 是使用 BSA 和甘油醛创建的。然后添加抗RAGE抗体和MAPK抑制剂（PD98059、SB203580、SP600125），随着时间的推移收集和提取RNA，并对钙化相关标志物和炎症标志物进行RT-PCR和实时PCR。 [结果]当在添加了AGE的培养牙髓细胞中添加抗RAGE抗体和MAPK抑制剂时，由于添加AGE而增加的OCN和S100A8/A9的表达显着降低。这表明RAGE和MAPK途径参与了培养的牙髓细胞的钙化以及由于AGE的添加而导致的炎症反应的增强。 [结论]糖尿病牙髓组织中AGE诱导病理性钙化和炎症反应增强，这可能是由RAGE-MAPK通路介导的。