アブラナ科自家不和合性分子ネットワークに関する遺伝学的・分子生物学的解析

十字花科自交不亲和性分子网络的遗传与分子生物学分析

基本信息

批准号：
19880004
负责人：
諏訪部圭太
金额：
$ 1.77万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

アブラナ科自家不和合性における認識反応以降の分子メカニズムを明らかにすることを目標に、Brassica rapa自家和合性突然変異体での遺伝解析とモデル植物シロイヌナズナ(自家和合性)での自家不和合性形質転換体の作出を試みた。1.B. rapaに関する研究B. rapa自家和合性突然変異体5系統と自家不和合性系統の交配より作出したF_1を育成し、各交配系統約100粒のF_2種子を獲得した。採種後、各後代F_2集団より20個体を任意選抜し、温室内で栽培し自家不和合性表現型を決定した。遺伝子型については、B. rapa連鎖地図に座上する113個のSSRマーカーの多型を各両親間で調査し、約80個の多型を有するSSRマーカーを選抜した。これらSSRマーカーについて、後代F_2集団での各遺伝子座の遺伝子型をPCR法によって決定した。2.シロイヌナズナに関する研究3種の異なるエコタイプ(#1、#2、Col-0)より自家不和合性雄蕊認識因子SP11/SCRをPCR法により単離し、その塩基配列を解読した。その結果、C末端側領域にすべてのエコタイプに共通する変異を見出した。また、エコタイプ#1、#2ではN末端領域に5bpの欠失、Col-0では変異境界領域に13bpの重複が存在することを見出した。これら変異をPCR法によって修復し、正常復元型SP11を構築した。タペート細胞特異的プロモーターと共に形質転換用ベクターに連結し、エコタイプ#1、#2に遺伝子導入した。各エコタイプよりT_0種子を獲得し、現在、植物体の育成中である。

对模式植物拟南芥(自交亲和)中白菜自交亲和突变体和自交不亲和性状的遗传分析，旨在阐明白菜自交亲和中识别反应后的分子机制进行了尝试。创建转化体。 1、白菜油的研究 F_1是由5个白菜自交亲和突变系与一个自交不亲和系杂交产生的，每个杂交获得约100粒F_2种子。收集种子后，从每个子代F_2群体中随机选取20个体，在温室中培养，以确定自交不亲和表型。关于基因型，对位于白菜连锁图谱中的113个SSR标记的各亲本间的多态性进行调查，选择了具有约80个多态性的SSR标记。对于这些SSR标记，通过PCR方法确定子代F_2群体中每个位点的基因型。 2.拟南芥研究通过PCR从3个不同生态型(#1、#2和Col-0)中分离出自交不亲和雄蕊识别因子SP11/SCR，并对其核苷酸序列进行了解码。结果，我们发现了 C 端区域所有生态型共有的突变。我们还发现生态型#1和#2在N端区域有5bp缺失，Col-0在突变边界区域有13bp重复。通过PCR修复这些突变并构建正常恢复的SP11。将其与绒毡层细胞特异性启动子一起连接至转化载体，并将该基因引入生态型#1和#2。从每个生态型获得 T_0 种子，目前正在种植植物。