癌抑制遺伝子産物BRCA2の核移行機構とC末端RAD51結合領域の機能の解明

阐明抑癌基因产物BRCA2的核转位机制及C端RAD51结合区的功能

基本信息

批准号：
06J04445
负责人：
吉川泰永
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

1.癌抑制遺伝子産物BRCA2のC末端RAD51結合領域におけるunclassified variants(UCVs)の解析家族性乳癌原因遺伝子産物BRCA2は、組換え酵素RAD51と相互作用することでDNA相同組換え修復に関与している。BRCA2はその中央に存在するBRC repeatsとC末端に存在するRAD51結合領域でRAD51と結合する。C末端RAD51結合領域にはCDK標的サイトとCyclin A認識モチーフが存在し、細胞周期に依存してRAD51と結合する。また、C末端RAD51結合領域には核移行シグナルが存在し、BRCA2を核内に輸送している。これまでにBRCA2には数多くのミスセンス変異が発見されているが、これらの変異の大部分はBRCA2の機能への影響や癌のリスクが不明なUCVsに分類されている。本研究では、BRCA2のUCVsのうち、機能ドメインが重複して存在するC末端RAD51結合領域に関するものに注目して機能を解析した。癌患者で変異が報告されている4種類のUCVsのクローンを得た。今回調べたいずれのUCVsでも核移行は正常であった。しかし、Mammalian two-hybrid assayによりRAD51と各UCVを持つC末端RAD51血行領域との結合能力を調べたところ、あるUCVが存在すると野生型より結合能力が弱くなった。さらに、Mammalian two-hybrid assayを用いてRAD51同士の相互作用に影響するか否か観察したところ、野生型および、このUCVを持つC末端RAD51結合領域は、ややRAD51同士の相互作用を阻害することがわかった。また、放射線により誘導されるRAD51フォーカス形成阻害実験を行ったところ、野生型のC末端RAD51結合領域では、RAD51のフォーカス形成を阻害したが、このUCVを持つC末端RAD51結合領域は、RAD51のフォーカス形成阻害をしなかった。以上の結果よりこのUCVはRAD51との結合に影響を与えることで発癌に関与する変異である可能性が示唆された。

1.抑癌基因产物BRCA2 C端RAD51结合区未分类变异体(UCV)的分析家族性乳腺癌致病基因产物BRCA2通过与重组酶RAD51相互作用参与DNA同源重组修复。 BRCA2 通过其中心的 BRC 重复序列和 C 末端的 RAD51 结合区与 RAD51 结合。 C 端 RAD51 结合区包含 CDK 靶位点和 Cyclin A 识别基序，并以细胞周期依赖性方式与 RAD51 结合。此外，C端RAD51结合区有一个核输出信号，将BRCA2转运到细胞核中。迄今为止，在 BRCA2 中已发现许多错义突变，但大多数突变被归类为 UCV，其对 BRCA2 功能和癌症风险的影响尚不清楚。在本研究中，我们重点分析了 BRCA2 UCV 与 C 端 RAD51 结合区相关的功能，该区域具有重叠的功能域。我们获得了四种 UCV 的克隆，据报道这些 UCV 在癌症患者中存在突变。此次检查的所有 UCV 中核易位均正常。然而，当我们使用哺乳动物二杂交试验研究RAD51和C端RAD51血液循环区域与每种UCV的结合能力时，我们发现在存在某种UCV的情况下，结合能力弱于野生型。此外，当我们使用哺乳动物双杂交实验观察其是否影响RAD51之间的相互作用时，我们发现野生型和具有该UCV的C端RAD51结合区域轻微抑制了RAD51之间的相互作用。此外，当我们进行辐射诱导的RAD51病灶形成抑制实验时，我们发现野生型C端RAD51结合区抑制RAD51病灶形成，但具有该UCV的C端RAD51结合区抑制RAD51病灶形成它没有抑制形成。上述结果表明，该UCV突变可能通过影响与RAD51的结合而参与癌变。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

BRCA2 loss of heterozygosity identified in a case of canine mammary cancer using novel microsatellite markers.

使用新型微卫星标记在一例犬乳腺癌病例中发现 BRCA2 杂合性缺失。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yasunaga Yoshikawa; Masami Morimatsu; Kazuhiko Ochiai; Masashi Nagano; Yukiko Tomioka; Nobuo Sasaki; Kazuyoshi Hashizume;Toshihiko Iwanaga
通讯作者：
Toshihiko Iwanaga

家族性乳癌原因遺伝子BRCA2のC末端RAD51結合領域におけるunclassified variantの解析

家族性乳腺癌致病基因 BRCA2 C 端 RAD51 结合区未分类变异的分析

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
吉川泰永;森松正美;岩永敏彦
通讯作者：
岩永敏彦

BRCA2 (FANCD1) loss of heterozygosity identified in mammary tumor of the dog

在狗的乳腺肿瘤中发现 BRCA2 (FANCD1) 杂合性缺失

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yasunaga Yoshikawa; Masami Morimatsu; Kazuhiko Ochiai; Masashi Nagano; Yukiko Tomioka; Nobuo Sasaki; Kazuyoshi Hashizume; Toshihiko Iwanaga
通讯作者：
Toshihiko Iwanaga

BRCA2 loss of heterozygosity identified in a case of canine mammary cancer using novel microsatellite markers

使用新型微卫星标记在一例犬乳腺癌病例中发现 BRCA2 杂合性缺失

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yasunaga Yoshikawa; Masami Morimatsu; Kazuhiko Ochiai; Masashi Nagano; Yukiko Tomioka; Nobuo Sasaki; Kazuyoshi Hashizume; Toshihiko Iwanaga
通讯作者：
Toshihiko Iwanaga

Application of explainable artificial intelligence for healthcare: A systematic review of the last decade (2011-2022)

可解释的人工智能在医疗保健中的应用：过去十年的系统回顾（2011-2022）