有効かつ安全なナノ医薬品の設計に資するナノマテリアルの安全性評価マーカーの探索

寻找纳米材料的安全评估标记，有助于设计有效和安全的纳米药物

基本信息

批准号：
12J00497
负责人：
東阪和馬
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J00497/
关键词：
ナノマテリアルバイオマーカープロテオミクス

项目摘要

申請者は、ナノ医薬品の安全性を開発段階において、早期に予測・診断できる安全性評価マーカーの探索を図り、その基礎情報の収集を推進している。当該年度は、薬物送達担体として期待される非晶質ナノシリカを対象素材とし、急性期における生体影響を反映した発現変動蛋白質について、血中蛋白質の量的・質的変化の網羅的な解析を実施した。BALB/cマウスに、粒子径が70nmの非晶質ナノシリカ(nSP70)を0.8mg/mouseで尾静脈より単回投与し、投与後24時間に血液を回収した。回収してきた血漿サンプルを用い、二次元ディファレンシャル電気泳動により発現変動蛋白質を網羅的に解析した結果、nSP70投与群において、生理食塩水投与群と比較し2倍以上発現が増加しているスポットが59個、逆に発現が減少しているスポットが23個見出された。質量分析装置により対応する蛋白質の同定を試みたところ、計7種の蛋白質の同定に成功した。同定された蛋白質の中で、本検討では、ヘモペキシンに着目し、以後の解析を進めた。非晶質シリカ曝露後の血中でのヘモペキシンの発現変動を定量解析するために、BALBlcマウスにnSP70、nSP300、mSP1000をそれぞれ0.8mg/mouseで尾静脈投与し、投与後24時間における血中ヘモペキシン量をELISAにより測定した。その結果、血中ヘモペキシン量はnSP70投与群でのみ生理食塩水投与群と比較して有意に増加することが明らかとなった。このことから、血中ヘモペキシン量が、非晶質シリカの粒子径の減少に伴い増加することが明らかとなった。今後は、これら血中ヘモペキシン量の増加と非晶質ナノシリカ投与により誘発される生体影響との連関解析を図ることで、ナノマテリアルの安全性を事前に予測・評価し得るシステムの確立を目指す。

申请人正在寻找能够在开发阶段早期预测和诊断纳米药物安全性的安全性评价标志物，并正在推动基础信息的收集。本财年，我们对血液蛋白的量变和质变进行了全面分析，重点关注有望用作药物输送载体的无定形纳米二氧化硅，以及表达变化反映急性期生物效应的蛋白质。做过。 BALB/c小鼠经尾静脉给予单剂量0.8 mg/只的粒径为70 nm的无定形纳米二氧化硅（nSP70），给药后24小时采血。使用收集的血浆样品，通过二维差示电泳对表达的蛋白质进行综合分析，结果，与盐水施用组相比，nSP70施用组中有59个点的表达增加了两倍以上。相反，发现了23个表达降低的点。当尝试使用质谱仪鉴定相应的蛋白质时，总共成功鉴定了七种蛋白质。在已鉴定的蛋白质中，本研究重点关注血红素结合蛋白并进行后续分析。为了定量分析接触无定形二氧化硅后血液中血红素结合蛋白表达的变化，我们通过尾静脉给BALBlc小鼠注射nSP70、nSP300和mSP1000，各0.8mg/只，对血液中血红素结合蛋白24进行定量分析。施用后数小时通过ELISA测定量。结果表明，与生理盐水施用组相比，仅在nSP70施用组中血液中血红素结合蛋白的量显着增加。这表明，随着无定形二氧化硅的粒径减小，血液中血红素结合蛋白的量增加。未来，我们的目标是通过分析血液血红素结合蛋白水平的增加与无定形纳米二氧化硅给药引起的生物效应之间的关系，建立一个可以提前预测和评估纳米材料安全性的系统。