有効かつ安全なナノ医薬品の設計に資するナノマテリアルの安全性評価マーカーの探索

寻找纳米材料的安全评估标记，有助于设计有效和安全的纳米药物

基本信息

批准号：
12J00497
负责人：
東阪和馬
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J00497/
关键词：
ナノマテリアルバイオマーカープロテオミクス

项目摘要

申請者は、ナノ医薬品の安全性を開発段階において、早期に予測・診断できる安全性評価マーカーの探索を図り、その基礎情報の収集を推進している。当該年度は、薬物送達担体として期待される非晶質ナノシリカを対象素材とし、急性期における生体影響を反映した発現変動蛋白質について、血中蛋白質の量的・質的変化の網羅的な解析を実施した。BALB/cマウスに、粒子径が70nmの非晶質ナノシリカ(nSP70)を0.8mg/mouseで尾静脈より単回投与し、投与後24時間に血液を回収した。回収してきた血漿サンプルを用い、二次元ディファレンシャル電気泳動により発現変動蛋白質を網羅的に解析した結果、nSP70投与群において、生理食塩水投与群と比較し2倍以上発現が増加しているスポットが59個、逆に発現が減少しているスポットが23個見出された。質量分析装置により対応する蛋白質の同定を試みたところ、計7種の蛋白質の同定に成功した。同定された蛋白質の中で、本検討では、ヘモペキシンに着目し、以後の解析を進めた。非晶質シリカ曝露後の血中でのヘモペキシンの発現変動を定量解析するために、BALBlcマウスにnSP70、nSP300、mSP1000をそれぞれ0.8mg/mouseで尾静脈投与し、投与後24時間における血中ヘモペキシン量をELISAにより測定した。その結果、血中ヘモペキシン量はnSP70投与群でのみ生理食塩水投与群と比較して有意に増加することが明らかとなった。このことから、血中ヘモペキシン量が、非晶質シリカの粒子径の減少に伴い増加することが明らかとなった。今後は、これら血中ヘモペキシン量の増加と非晶質ナノシリカ投与により誘発される生体影響との連関解析を図ることで、ナノマテリアルの安全性を事前に予測・評価し得るシステムの確立を目指す。

申请人正在寻求安全评估标记，可以在开发阶段预测和诊断纳米药物的安全性，并正在促进基本信息的收集。在这个财政年度，对血液蛋白的定量和定性变化进行了全面分析，对无定形纳米甲硅硅氧基菌进行了预期是药物递送载体，以及在可变体中表达的蛋白质，反映在急性阶段中的生物学作用。 BALB/C小鼠在尾静脉中以0.8 mg/小鼠为70 nm的粒径为70 nm，给予BALB/C小鼠，并在给药后24小时收集血液。使用收集的血浆样品，我们通过二维差异电泳对可变蛋白进行了全面分析，并在NSP70组中发现了59个斑点，表达增加到盐水组的两倍以上，相反，NSP70组中的23个斑点被发现降低了。当使用质谱仪鉴定相应的蛋白质时，成功鉴定了总共七个蛋白质。在确定的蛋白质中，这项研究的重点是血红素，然后进行了后续分析。为了定量地分析暴露于无定形二氧化硅后血液中血液表达的变化，分别以0.8 mg/小鼠的速度给予BALBLC小鼠，并分别以0.8 mg/小鼠的身份给予血液表达，并在给药后24小时通过ELISA测量血液血压素水平。结果，发现与盐水组相比，NSP70组中血液中的血兴素量显着增加。这表明血液中的血兴素量随着无形二氧化硅粒径的减少而增加。将来，我们旨在建立一个可以通过分析血液中血红素升高水平与通过无定形纳米硅糖引起的生物学作用之间的联系来提前预测和评估纳米材料安全的系统。