定常期におけるROS受容体としてのPrxの機能解析

Prx 作为 ROS 受体在稳定期的功能分析

• 批准号: 11J10274
• 负责人: 大舘 巧
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Tohoku Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J10274/
• 关键词: グルタチオンペルオキシダーゼ; オレイン酸; 細胞壁; Ccw12; ERストレス; 油滴; グルタチオンペルオキシダーゼ ペルオキシレドキシン; レドックス; Cyc8

gpx1∆株は野生株と比較してオレイン酸培地で生育が低下することを見出している(Ohdate and Inoue, BBA, 2012)。昨年度、その原因を明らかにするためにDNAマイクロアレイ解析を行い、gpx1∆株では細胞壁の構成因子の発現が減少していることを見出した。減少していた細胞壁構成因子のうち、細胞壁マンノースタンパク質をコードするCCW12遺伝子をgpx1∆株に導入したところ、オレイン酸培地におけるgpx1∆株の生育低下を回復することを新たに見出した。gpx1∆株では、Ccw12のmRNAレベルだけでなく、細胞全体のタンパク質レベルでもCcw12の減少が観察された。Ccw12は翻訳後、ERとゴルジ体で糖鎖修飾を受け細胞膜、そして細胞壁へ輸送される。我々は、gpx1∆株のオレイン酸培地での生育低下には、Ccw12の量の減少だけでなく、Ccw12の輸送も関与しているのではないかと考え検討を行った。酵母細胞を可溶性画分と膜画分に分画したところ、野生株では、オレイン酸培地に移したあと、各画分のCcw12は徐々に消失していた。gpx1∆株では、野生株よりもCcw12の消失速度が遅くなっており、gpx1∆株ではCcw12の輸送が遅延していると考えられた。このことから、gpx1∆株はCcw12の量が少ないだけでなく、輸送速度が遅いことで、オレイン酸培地に移した時にかかるストレスに野生株ほど対処できなくなっており、gpx1∆株がオレイン酸培地で生育が低下したと考えられる。オレイン酸培地での生育低下は、Gpx1の機能に必要なシステイン残基の置換体では回復しないことから、Gpx1のレドックス制御がなんらかの形でCcw12の発現や輸送に影響していると推測される。

与野生菌株相比，已经发现GPX1∆菌株在油酸培养基中的生长速率较低（Ohdate and Inoue，BBA，2012年）。去年，进行了DNA微阵列分析以澄清原因，并发现在GPX1Δ菌株中降低了细胞壁成分因子的表达。在减少的细胞壁组成因子中，当将编码细胞壁甘露糖蛋白的CCW12基因引入GPX1Δ菌株中时，新发现的是，恢复了油酸培养基中GPX1Δ菌株的生长下降。在GPX1Δ菌株中，不仅在CCW12的mRNA水平上，而且在整个细胞中的蛋白质水平上都观察到CCW12的降低。翻译后，CCW12在ER和高尔基体中进行糖基化修饰，并将其转运到细胞膜和细胞壁。我们认为，油酸培养基中GPX1Δ菌株的生长下降不仅参与CCW12的量减少，而且还参与CCW12的运输。当将酵母细胞分离为可溶性和膜级分时，在野生应变中，每只馏分中的CCW12在转移到油酸培养基中后逐渐消失。 GPX1Δ应变的消失速率比野生应变慢，并且人们认为GPX1Δ应变的CCW12延迟延迟。由此，可以认为GPX1Δ应变不仅具有少量的CCW12，而且具有缓慢的运输速度，因此很难应付当在野生菌株中转移到油酸培养基时所施加的应力，而GPX1Δ菌株的生长降低了油酸培养基的降低。由于油酸培养基的生长下降不会用GPX1功能所需的半胱氨酸残基的取代而恢复，因此据推测，GPX1的氧化还原控制以某种方式影响了CCW12的表达和运输。

项目成果

ペルオキシソーム分裂を制御するPex11の多量体形成における酵母GPxの機能解析

酵母 GPx 在控制过氧化物酶体分裂的 Pex11 多聚化中的功能分析

• 发表时间: 2011
• 作者: 大館巧;井上善晴;久下周佐
• 通讯作者: 久下周佐

出芽酵母Gpxlがlipid dropletの形成に与える影響

酿酒酵母 Gpxl 对脂滴形成的影响

• 发表时间: 2013
• 作者: 大舘巧;井上善晴;久下周佐
• 通讯作者: 久下周佐

抗アポトーシス因子Bag-1がERKのリン酸化に与える影響

抗凋亡因子Bag-1对ERK磷酸化的影响

• 发表时间: 2012
• 作者: 大舘巧;友田文;佐々木貴彦;今野堅一郎;高野博明;岩井健太;久下周佐
• 通讯作者: 久下周佐