新規遺伝子発現制御機構を介した植物ウイルスの生存戦略の解明

阐明新型基因表达控制机制介导的植物病毒的生存策略

• 批准号: 11J02599
• 负责人: 楢林 大樹
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J02599/
• 关键词: 植物RNAウイルス; 5'非翻訳領域(UTR); マイナス鎖合成; 翻訳制御

Melandrium yellow fleck virus (MYFV)のRNA3の5'非翻訳領域(UTR)が担う、RNA3の複製やサブゲノムRNA4の翻訳における制御機構を本解析することで、ウイルスの生存戦略の一端を明らかにすることを目的として、以下の二つの機能について研究をおこなった。A)MYFV-RNA3の5'UTRのDS1領域が担う、RNA3の複製における機能の解明前年度までに、この二本鎖構造はRNA3のマイナス鎖合成に重要であることを明らかにした。この構造に類似した構造が他のプロモウイルスにも見られた。Brome mosaic virus (BMV)の二本鎖構造がMYFVのRNA3の複製にも機能するか、この領域の置換体を作成してNicotianabenthamianaのプロトプラストに接種した。その結果、BMVの構造に置き換えたRNA3変異体も複製能を保持していたことから、BMVの構造も1姻A3の複製に対して機能しうると考えられた。RNA3の欠失変異体をBMVのRNA1,2とともに接種した場合、欠失変異体の蓄積量はある程度低下した。一方、MYFVのRNA1,2とともに接種した場合には欠失変異体は蓄積しなかったことから、この2本鎖構造の機能は複製酵素の種類に依存すると考えられた。B)MYFV-RNA3の5,UTRのDS2領域によるサブゲノムRNA4の翻訳制御機構の解明RNA4の翻訳の実態について調べるために、ポリソーム解析やランオファッセイをおこない、翻訳の開始反応や伸長反応が阻害されているか検証した。しかし、年度内には明確な結果は得られなかった。今回得られた結果は、ウイルスの一細胞における増殖サイクルの理解に大きく寄与すると考えている。

通过分析负责对RNA3复制和亚基因组RNA4翻译中5'非翻译区（UTR）5'未翻译区域（UTR）的调节机制，我们对以下两个功能进行了研究，目的是阐明该病毒生存策略的因素。 a）到上一年，在RNA3复制中MyFV-RNA3的DS1区域的功能之前，该双链结构对于RNA3的负链合成很重要。在其他前言病毒中也可以看到与这种结构相似的结构。 Brome Mosaic病毒（BMV）的双链结构还起作用以复制MyFV RNA3，或者创建了该区域的取代，以接种烟草原生体。结果，由BMV结构取代的RNA3突变体也保留了复制能力，人们认为BMV结构也可以起作用1 A3。当RNA3缺失突变体与BMV的RNA1和2接种时，缺失突变体的积累在一定程度上还原。另一方面，当接种MyFV的RNA1和2时，缺失突变体并未积聚，因此该双链结构的功能被认为取决于复制酶的类型。 b）通过MyFV-RNA3 5和UTR阐明亚基因组RNA4的平移控制机理，以研究RNA4的实际翻译，多溶胶组分析和兰花 - 佛经的实际状态，以验证是否抑制翻译起始和伸长响应。但是，在财政年度内没有明确的结果。我们认为，这次获得的结果将极大地有助于理解病毒一个细胞中的增殖周期。

项目成果

A Double-Stranded Structure in the 5' Untranslated Region of Melandrium yellow fleck bromovirus RNA3 Is Involved in Its Negative-Strand RNA Synthesis

黑斑黄斑溴病毒RNA3 5非翻译区的双链结构参与其负链RNA的合成

• 发表时间: 2012
• 作者: Yuuki Nagamoto;Kiyosei Takasu;Yoshiji Takemoto;M. Shahien;M. Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;楢林大樹
• 通讯作者: 楢林大樹

A transcription-dependent translational regulation in the subgenomic RNA of Melandrium yellow fleck bromovirus

黑斑黄斑雀斑病毒亚基因组 RNA 的转录依赖性翻译调控

• 发表时间: 2011
• 作者: Yuuki Nagamoto;Kiyosei Takasu;Yoshiji Takemoto;M. Shahien;M. Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;M.Shahien;楢林大樹;楢林大樹;楢林大樹
• 通讯作者: 楢林大樹