Development of an activity quantitation method for signal transduction factors in living cells using inhibitors as probes

使用抑制剂作为探针开发活细胞中信号转导因子的活性定量方法

• 批准号: 23651233
• 负责人: MAEDA Tatsuya
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23651233/
• 关键词: 活性依存型阻害剤; mTOR; カルパイン; ワートマニン; TPCK; E-64-d; 抗ハ プテン抗体; 抗ハプテン抗体

Some inhibitors for signal transduction factors covalently attach to the target catalytic residues in their targets only when the targets are activated and the reactivity of the catalytic residues become high. A methodology was developed that exploits this reactivity as an activity quantitation method for signal transduction factors. To detect covalent modifications by inhibitors, western blotting using antibodies raised against the modification groups as haptens was used. To evaluate the methodology, three inhibitors targeting the TOR pathway or the yeast Rim101 pathway were tested.

一些信号转导因子抑制剂仅当靶标被激活且催化残基的反应性变高时才共价附着至其靶标中的靶催化残基。开发了一种方法，利用这种反应性作为信号转导因子的活性定量方法。为了检测抑制剂的共价修饰，使用针对修饰基团作为半抗原产生的抗体进行蛋白质印迹。为了评估该方法，测试了三种针对 TOR 途径或酵母 Rim101 途径的抑制剂。

项目成果

TORC1 regulation mediated by stress granule formation upon heat stress

热应激时应激颗粒形成介导的 TORC1 调节

• 发表时间: 2011
• 作者: Seiji Sakamoto;Yasuyuki Araki;and Takehiko Wada;谷川美頼;坂本清志,寺内美香,Hugo Anna,瀧集作,荒木保幸,和田健彦;前田達哉;高原照直;Seiji Sakamoto;葛西秀俊;Seiji Sakamoto;谷川美頼;Seiji Sakamoto;坂本清志;高原照直
• 通讯作者: 高原照直

mTOR シグナルの分子メカニ ズムと生理的役割

mTOR信号的分子机制和生理作用

• 发表时间: 2011
• 作者: 瀧集作;坂本清志;荒木保幸;和田 健彦;高原照直;瀧集作,坂本清志,寺内美香,荒木保幸,和田健彦;前田達哉
• 通讯作者: 前田達哉

Sphingolipids regulate the yeast high osmolarity-responsive HOG pathway

鞘脂调节酵母高渗透压响应的 HOG 通路

• DOI: 10.1128/mcb.06111-11
• 发表时间: 2012
• 期刊: Mol. Cell. Biol
• 作者: Tanigawa M;Kihara A;Terashima M;Takahara T;Maeda T
• 通讯作者: Maeda T

中枢神経系において恒常的活性化型mTORを発現するマウスの作製と解析

中枢神经系统中表达组成型激活 mTOR 的小鼠的生成和分析

• 发表时间: 2012
• 作者: Yamamoto K;Ueta Y;Wang L;Yamamoto R;Inoue N;Inokuchi K;Aiba A;Yonekura H;Kato N.;饗場篤
• 通讯作者: 饗場篤

シグナル伝達キーワード事典

信号转导关键词百科

• 发表时间: 2012
• 作者: Mizoguchi;T.;森脇淳;山本 雅
• 通讯作者: 山本 雅