Studies on application of laser microdissection technique for an assessment of ovarian toxicity of xenobiotics

应用激光显微切割技术评估异生素卵巢毒性的研究

• 批准号: 23580431
• 负责人: SHIROTA Mariko
• 金额: $ 3.41万
• 依托单位: Azabu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23580431/
• 关键词: mdr1; ABCB1a; ABCB1b; ovary; laser microdissection; in situ hybridization; real-time PCR; rat; 卵巣; 毒性; P糖タンパク質; レーザーマイクロダイセクション; 幼若ラット; ウマ絨毛性性腺刺激ホルモン; 卵巣毒性評価; ABCトランスポーター; 時間分解PCR; 卵胞発育; 卵巣毒性; SLCトランスポーター

In order to determine tissue specific expression of multiple drug resistance (mdr) 1 in the rat ovary, ovaries were collected daily from immature female rats treated with gonadotropin to ovulate spontaneously three days after the treatment. Immunohistochemical analysis of the ovaries using a primary antibody, which reacts with two types of isoforms of the mdr1, revealed localization of the mdr1 in the granulosa cells of growing follicles and luteal cells. Since quantitative analyses of mRNAs encoding the isoforms, ABCB1a and ABCB1b, and in situ hybridization suggested divergent expression of the both forms in the corpus luteum, luteal tissues were dissected from the ovaries by a laser microdissection technique. Quantitative analyses of the mRNAs in the dissected luteal tissues indicated that ABCB1a, but not ABCB1b, increased with development of the corpus luteum.

为了测定大鼠卵巢中多重耐药性(mdr) 1 的组织特异性表达，每天从用促性腺激素治疗的未成熟雌性大鼠中收集卵巢，在治疗三天后自发排卵。使用一抗对卵巢进行免疫组织化学分析，该抗体与两种类型的 mdr1 同工型发生反应，揭示了 mdr1 在生长卵泡和黄体细胞的颗粒细胞中的定位。由于对编码亚型 ABCB1a 和 ABCB1b 的 mRNA 的定量分析以及原位杂交表明这两种形式在黄体中的表达存在差异，因此通过激光显微切割技术从卵巢中切下黄体组织。对解剖黄体组织中 mRNA 的定量分析表明，ABCB1a（而非 ABCB1b）随着黄体的发育而增加。

项目成果

幼若ラットの卵巣におけるMultidrug resistant protein (MDR) 1/ATP-binding cassette subfamily B(ABCB)1の発現

幼鼠卵巢中多药耐药蛋白（MDR）1/ATP结合盒亚家族B（ABCB）1的表达

• 作者: 菊地朝香;鈴木真歩;山本萌;小川祐布子;川嶋潤;代田欣二;代田眞理子
• 通讯作者: 代田眞理子

生殖生物学から理解する卵巣毒性

从生殖生物学了解卵巢毒性

• 作者: 菊地朝香;鈴木真歩;山本萌;小川祐布子;川嶋潤;代田欣二;代田眞理子;代田眞理子
• 通讯作者: 代田眞理子

幼若ラットの卵巣におけるMultidrug resistant protein（MDR)1/ATP-binding cassette subfamily B（ABCB)1の発現

幼年大鼠卵巢中多药耐药蛋白（MDR）1/ATP结合盒亚家族B（ABCB）1的表达

• 发表时间: 2013
• 作者: 菊地 朝香;鈴木 真歩 ;山本 萌 ;小川 祐布子 ;川嶋 潤 ;代田 欣二 ;代田 眞理子
• 通讯作者: 代田 眞理子