プロスタグランジンの排卵受精促進におけるケモカインの役割に関する研究

趋化因子在前列腺素促排卵受精中作用的研究

• 批准号: 04J01259
• 负责人: 丹波 茂郎
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J01259/
• 关键词: プロスタグランジン; ケモカイン; 排卵; 受精; 卵丘細胞; EP2受容体; インドメタシン; cAMP; ケモカイン受容体遮断薬; EP4受容体; ゴナドトロピン

プロスタグランジン(PG)E2受容体EP2欠損マウスは受精障害を示すが、その障害の分子機構については明らかでなかった。EP2受容体は卵丘細胞に発現することから、受精障害は卵丘の機能不全に由来すると考え、研究代表者は、EP2欠損マウス卵丘の遺伝子発現を解析し、野生型に比べEP2欠損ではケモカイン(CCL2,7,9)とその受容体(CCR1/2)発現が亢進することを見出した。そこで本研究では、EP2欠損における受精障害とケモカインの関係を明らかにすることを試みた。1 野生型/EP2欠損マウスの卵丘におけるケモカイン発現定量的PCRならびに免疫染色の結果、ケモカインは、ゴナドトロピン処理後3,9時間の卵丘には存在しないが、排卵後(14時間)に野生型卵丘に見られ、EP2欠損卵丘ではさらに高レベルで存在していた。2 インドメタシン処理マウスの卵丘におけるケモカイン発現野生型マウスにインドメタシンを皮下投与すると、受精率の低下が見られるが、この際もEP2欠損と同様、ゴナドトロピン処理後14時間において高レベルのケモカイン発現が確認された。3 卵丘ケモカイン発現に対するPGの影響野生型卵丘をPGE2、インドメタシン(indo)およびcAMPで処理したところ、ケモカイン発現はPGE2、cAMPにより抑制、indoにより亢進した。一方、EP2欠損卵丘ではPGE2、indoは効果を示さず、cAMPでのみ抑制された。4 受精に対するケモカインの影響ケモカインの体外受精に対する影響を調べたところ、ケモカインは野生型の受精率を低下させた。この効果は、卵丘除去した卵では見られなかったことから、ケモカインは、受精に対して抑制的に働くことが示された。以上の結果より、PGE2-EP2シグナルは、卵丘のケモカイン発現を抑制することで受精を促進することが明らかとなった。

缺乏前列腺素（PG）E2受体EP2的小鼠表现出受精受损，但这种受损的分子机制仍不清楚。由于EP2受体在卵丘细胞中表达，主要研究者认为受精障碍源于卵丘功能障碍，我们发现趋化因子（CCL2、7、9）及其受体（CCR1/2）的表达增加。因此，在本研究中，我们试图阐明EP2缺乏症中趋化因子与受精障碍之间的关系。 1 野生型/EP2缺陷小鼠卵丘中趋化因子的表达 定量PCR和免疫染色结果显示，促性腺激素处理后3小时和9小时，卵丘中不存在趋化因子，而野生型在排卵后(14小时)存在。在积云中发现，并且在缺乏 EP2 的积云中存在更高的水平。 2 吲哚美辛治疗小鼠卵丘中趋化因子的表达 当对野生型小鼠皮下注射吲哚美辛时，观察到受精率下降，但与 EP2 缺陷相似，在促性腺激素治疗 14 小时后证实了高水平的趋化因子表达。完成了。 3 PG对卵丘趋化因子表达的影响 当野生型卵丘用PGE2、吲哚美辛(indo)和cAMP处理时，趋化因子表达被PGE2和cAMP抑制，而被indo增强。另一方面，在缺乏 EP2 的卵丘中，PGE2 和 indo 没有作用，仅被 cAMP 抑制。 4 趋化因子对受精的影响 当我们考察趋化因子对体外受精的影响时，发现趋化因子降低了野生型的受精率。在去除卵丘的卵中没有观察到这种效应，表明趋化因子以抑制受精的方式起作用。上述结果表明PGE2-EP2信号通过抑制卵丘中趋化因子的表达来促进受精。

项目成果

特許「ケモカイン阻害剤またはその塩を有効成分とする不妊治療剤」

专利：“一种含有趋化因子抑制剂或其盐作为活性成分的不孕症治疗剂”

• 发表时间: 2004

Microarray evaluation of EP4 receptor mediated prostaglandin E2 suppression of 3T3-L1 adipocyte differentiation.

EP4受体介导的前列腺素E2抑制3T3-L1脂肪细胞分化的微阵列评估。

• 发表时间: 2004
• 作者: Sugimoto; Y.; Tsuboi; H.; et al.
• 通讯作者: et al.