Molekulare Evolution der Wasserstoffperoxid-abhängigen Hydroxylierungsaktivität von CYP106A2

CYP106A2 过氧化氢依赖性羟基化活性的分子演化

• 批准号: 5394581
• 负责人: Professorin Dr. Rita Bernhardt
• 金额: --
• 依托单位: Lehrstuhl für Biochemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5394581?language=en
• 关键词: Molekulare; Evolution; der; Wasserstoffperoxid; abh

Stereo- und regioselektive Steroidhydroxylierungen gehören zu den chemisch komplizierten und aufwendigen Verfahren. CYP106A2 ist eine Cytochrom P450-abhängige Steroidhydroxylase, die 11-Desoxycorticosteron selektiv in der 15ß-Position hydroxyliert. Sie benötigen dafür Elektronen, die über eine FAD-abhängige Reduktase und eine Eisen-Schwefel-Protein zur Verfügung gestellt werden. Einige Cytochrome P450 können aber auch mit Hilfe von Peroxiden Hydroxylierungen katalysieren. Das Ziel des Projektes besteht darin, mit Hilfe der Methoden der molekularen Evolution (Zufallsmutagenese bzw. DNA-Shuffling und Selektion der gewünschten Mutanten) eine essentielle Verbesserung der Peroxid-abhängigen Hydroxylierung durch CYP106A2 zu erreichen. Das Labor von Dr. F. Arnold wurde für den Aufenthalt (2 Monate im Rahmen eines Forschungsfreisemesters) ausgewählt, weil sie: 1) als Pionierin auf dem Gebiet des evolutiven Proteindesigns gilt; 2) bereits ein anderes Cytochrom P450 (CYP101) evolutiv dahingehend entwickelt hat, dass die Hydroperoxid-abhängige Aktivität dieses Enzyms entscheidend verbessert werden konnte; 3) der Antragstellerin die Möglichkeit bietet, konzeptionelle und experimentelle Ansätze auf dem Gebiet des evolutiven Proteindesigns in ihrem Labor unmittelbar kennenzulernen.

立体声和区域选择性类固醇羟基化物是化学合成和应用的。 dafür Elektronen、die über eine FAD-abhängige Reduktase 和 eine Eisen-Schwefel-Protein zur Verfügung gestellt werden。分子进化方法（Zufallsmutagenese bzw. DNA 改组和选择 der gewünschten Mutanten）是过氧化物-abhängigen Hydroxylierung 的本质要素2) 细胞色素 P450 (CYP101) 3) der Antragstellerin die Möglichkeit bietet, konzeptionelle und Experimentelle Ansätze auf dem Gebiet des evolutiven Proteindesigns in ihrem Labor unmittelbar kennenzulernen.