Development of peptide-immobilized TiO2 chip for monitoring of intracellular protein phosphorylation signals.

开发用于监测细胞内蛋白质磷酸化信号的肽固定二氧化钛芯片。

• 批准号: 21710121
• 负责人: SONODA Tatsuhiko
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kitakyushu National College of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21710121/
• 关键词: バイオチップ; 細胞内シグナル伝達; ペプチドチップ; 酸化チタン; タンパク質リン酸化; 網羅的解析; プロテインキナーゼ

A peptide array using a titanium oxide plate for detection of protein kinase activity has been investigated. First, the titanium oxide plate was prepared by sol-gel method. The plate has relatively flat surface and high hydrophilicity rate of photo-induced surface wettability conversion by UV irradiation. Furthermore, we succeeded that the surface wettability was controlled reversibly using hypobaric drying and UV irradiation. Next, complex with poly(acrylic)acid and protein kinase A (PKA) substrate peptide (PAA/PEP) was synthesized. We confirmed that PAA/PEP was phosphorylated by PKA, by coupled enzyme assay. Finally, fluorescenced poly(acrylic)acid (F-PAA) was immobilized on the titanium oxide plate, and the plate was sonicated in water. After washing, F-PAA still remained on the plate. It suggested that a bonding is formed between F-PAA and titanium oxide plate. From above results, we would establish the basis technique to develop the peptide array using the titanium oxide plate.

已经研究了使用氧化钛板检测蛋白激酶活性的肽阵列。首先，氧化钛板是通过Sol-Gel方法制备的。该板具有相对平坦的表面，并且通过紫外线照射的光诱导的表面润湿性转化率很高。此外，我们成功地，使用低估的干燥和紫外线照射对表面润湿性可逆地控制。接下来，合成了与聚（丙烯酸）酸和蛋白激酶A（PKA）底物肽（PAA/PEP）的复合物。我们证实了PAA/PEP通过偶联酶测定的PKA磷酸化。最后，将荧光的聚（丙烯酸）酸（F-PAA）固定在氧化钛板上，并在水中超声处理。洗涤后，F-PAA仍留在盘子上。它表明在F-PAA和氧化钛板之间形成键合。从上面的结果中，我们将建立使用氧化钛板开发肽阵列的基础技术。

项目成果

細胞内リン酸化シグナル網羅的解析を指向したペプチド固定化酸化チタン基板の開発

开发用于细胞内磷酸化信号综合分析的肽固定二氧化钛底物

• 发表时间: 2011
• 作者: 岡本憲二;佐甲靖志;園田達彦
• 通讯作者: 園田達彦

キナーゼ基質ペプチド固定化酸化チタン基板の調製とペプチドアレイヘの応用

激酶底物肽固定二氧化钛底物的制备及其在肽阵列中的应用

• 发表时间: 2010
• 作者: 園田達彦;他
• 通讯作者: 他

キナーゼ基質ペプチド固定化酸化チタン基板の調製とペプチドアレイへの応用

激酶底物肽固定二氧化钛底物的制备及其在肽阵列中的应用

• 发表时间: 2010
• 作者: 園田達彦;他
• 通讯作者: 他

キナーゼ活性検出のためのペプチド固定化酸化チタン基板の創製

创建用于检测激酶活性的肽固定二氧化钛底物

• 发表时间: 2010
• 作者: 園田達彦;他
• 通讯作者: 他

酸化チタンをベースとした細胞内リン酸化シグナル網羅的解析のためのペプチドアレイの開発

开发基于氧化钛的肽阵列以全面分析细胞内磷酸化信号

• 发表时间: 2009
• 作者: 園田達彦;他
• 通讯作者: 他