移植細胞の生着率向上に向けた細胞接着剤の基礎的研究

提高移植细胞存活率的细胞粘合剂基础研究

基本信息

批准号：
21659074
负责人：
田口哲志
金额：
$ 1.92万
依托单位：
National Institute for Materials Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659074/
关键词：
細胞接着剤架橋両親媒性高分子細胞凝集塊スフェロイド

项目摘要

ポリエチレングリコール(PEG)鎖の片末端にオレイル基を有し、もう片末端に活性エステル基を有する誘導体とエチレンジアミンとの反応によりPEG鎖の両末端に疎水性基のオレイル基が導入された細胞接着剤(Oleyl-PEG-Oleyl)を合成した。得られた細胞接着剤をHepG2肝細胞に添加することによる凝集塊形成を評価した。凝集塊形成は、時間および濃度依存的に形成された。得られた凝集塊の生化学的機能をアルブミン産生の定量により評価した結果、7日目において細胞接着剤無添加の場合と比較して4倍以上の向上が認められた。一方、両末端にアミノ基を有するPEGにコレステロール基を導入した細胞接着剤(Chol-PEG-Chol)も合成し、リボソーム溶液に添加後のゲル形成を動的粘弾性評価により測定した。Chol-PEG-Cholの濃度が20mg/ml以上の条件においてリポソームゲルが形成した。分解性の経時的な評価により、得られたリポソームゲルは水と接触すると、水の吸収により一定時間で膨潤し、その後水に溶解しネットワークの全体的な分解に至ることが明らかとなった。高い架橋密度の場合には、ゲルの分解速度は遅くなった。ゲルの分解挙動をより直接的に評価するため、デキストランブルーを内包したリポソームゲルを調製した。内包されたデキストランブルーのin vitro徐放実験の結果から計算した拡散指数は0.87であり、ゲルの表面浸食とゲルのバルクの分解がこの徐放プロセスを支配していることが明らかとなった。

A cell adhesive (Oleyl-PEG-Oleyl) in which a hydrophobic oleyl group was introduced at both ends of the polyethylene glycol (PEG) chain by reaction between a derivative having an oleyl group at one end and an active ester group at the other end and an ethylenediamine was used to synthesize a cell adhesive (Oleyl-PEG-Oleyl) in which a hydrophobic oleyl group was introduced at both钉链的末端。通过将所得的细胞粘合剂添加到HEPG2肝细胞中来评估聚集形成。聚集形成是时间和浓度依赖性的。通过定量白蛋白产生评估所获得的亲聚体的生化功能，与未添加细胞粘合剂相比，第七天有四倍的改善。另一方面，还合成了将胆固醇基团引入具有氨基组的PEG中的细胞粘合剂（Chol-Peg-Chol），并且还合成了氨基组的PEG，并且通过动态粘弹性评估测量了核糖体溶液后的凝胶形成。在Chol-Peg-Chol浓度为20 mg/ml或更高的条件下形成的脂质体凝胶。对随着时间的流逝的可降解性的评估表明，由于吸水而与水接触时，获得的脂质体凝胶在一定时间内获得的脂质凝胶肿胀，然后溶解在水中，从而导致网络的总体降解。在高交联密度下，凝胶的分解速率较慢。为了更直接地评估凝胶的降解行为，制备了含有右旋蓝色的脂质体凝胶。从体外持续释放实验的结果计算出的扩散指数为0.87，揭示了凝胶的表面侵蚀和凝胶的块状分解占据了这种持续的释放过程。