水田土壌における脱窒微生物共存系の存在を探る

探讨水稻土反硝化微生物共存系统的存在性

基本信息

批准号：
21658024
负责人：
妹尾啓史
金额：
$ 2.05万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21658024/
关键词：
水田土壌脱窒微生物微生物共存系 Functional Single Cell分離法

项目摘要

目的:本研究では単一菌株においてよりも異種細菌の共存状態において脱窒活性の高まる共存系を「脱窒微生物共存系」とし、その発見、機能と生態の解明を目的とした。21年度の結果から、「脱窒微生物共存系」の存在が示唆されたものの、その確定には至らず、その候補となる共存系も2組と少なかった。そこで、より効率的に「脱窒微生物共存系」を分離する方法が求められた。方法:21年度の分離法では、水田土壌ミクロコズムからFSC分離法により共存系を分離するまでの過程で、土壌中で近接していることが予想される「脱窒微生物共存系」が分散してしまっている可能性があり、そのことが「脱窒微生物共存系」の分離を困難にしていると考えられた。そこで、脱窒活性を高めた水田土壌ミクロコズムから土壌懸濁液を調整し、30μlずつを分注したうえで細胞分裂阻害剤を添加した。これにより「脱窒微生物共存系」の存在によって増殖が可能になり、細胞が伸長する菌株が存在した場合、その共存系を構築する菌株はこの30μlの土壌懸濁液中に存在することとなる。このことにより、「脱窒微生物共存系」の分散を抑えることが可能になり、分離した共存系が実際に環境中で共存系を構築している蓋然性を高めることが可能になった。共存系の分離後、単一菌株の純粋分離培養を行い、再び共存系を構築して単一菌株と共存系それぞれの脱窒活性を比較した。結果:34組の共存系について純粋分離培養を行い84菌株を得た。そのなかで3組のについて「脱窒微生物共存系」であることが示唆された。また、21年度に分離した共存系について追試を行った所、あらたに2組が「脱窒微生物共存系」であることが示唆された。

目的：在这项研究中，共存系统是“可抑制的微生物系统”，从而增加了不同细菌在异质细菌共存中的性能，并且发现，阐明功能和生态学的目的。 2009财年的结果表明存在“剥夺者”的“共存”，但没有达到这一点，并且存在两对共存。因此，需要更有效地分离“共存系统”的方法。方法：在2011财年的分离方法中，“ Sepjolysis共存系统”有望通过FSC分离方法靠近土壤中的土壤与共存分离的土壤。人们认为很难将“ CO存在”分开。因此，从稻田的微橄榄球中调节土壤悬浮液，该土壤微赤叶具有增强的Nourdels，并在分布30μl后添加了细胞分裂抑制剂。这使得可以通过“共存”和延伸细胞的细菌而增殖，并且构建共存系统的细菌将在30μl的土壤悬架中。结果，有可能抑制“消化者”的“共存”的分散，而分离的共存系统提高了在环境中共存的性质。共存系统分离后，进行了单个细菌菌株的纯分离培养物，并再次构建了共存系统，以比较单个细菌菌株和共存系统的反硝基。结果：对34对共存系统进行了纯粹的分离培养，并获得了84种细菌。其中，有人建议这三对是“肉眼的共存”。此外，建议在2011财年分离后的分离后测试测试中“应该是“反硝酸盐”。