イネの雑種花粉不稔遺伝子S19のポジショナルクローニング

水稻杂交花粉不育基因S19的定位克隆

基本信息

批准号：
10F00401
负责人：
吉村淳
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2012
项目状态：
已结题

项目摘要

当初研究計画ではO.sativa/O.glaberrima交雑後代に見出されたF1花粉不稔遺伝子座S19の単離を目指していたが、Giao氏滞在期間中の単離の困難さ、および国際的な生殖的隔離研究の動向を見極め、重複遺伝子の機能喪失モデルによって説明可能なO,sativa/O.rufipogon交雑後代のF1花粉不稔遺伝子座5器5およびSK36の単離に研究テーマを変更して実験を行った。Giao氏は、SK35/SK36のアリルの機能性に関して全容を解明するため、PG1_SK35-T65+,PG1c_SK36-niv+,PGld_SK36-niv+,PGle_SK36-niv+ゲノミックコンストラクトをSK35花粉半不稔個体およびSK36花粉半不稔個体に形質転換し、計8組み合わせにおいて、T1あるいはT2におけるSK35/SK36の遺伝子型頻度を調査した。いずれのコピーも機能性を有している事が明らかとなった。二細胞期、三細胞期における発現をRT-qPCRにて解析したところ、SK35半不稔個体およびSK36半不稔個体はT65と比べて発現量が半減している事が明らかとなった。以上の内容について原著論文の原稿を作成し、投稿直前まで準備を行ったが、形質転換実験のコントロール区について不明瞭な結果が得られたため、投稿を行うことができなかった。コントロール区に関する実験データが得られ次第、論文投稿を行うことでGiao氏とのコンセンサスを得た。

原本的研究计划是分离在O. sativa/O. 杂交后代中发现的F1花粉不育位点S19，但由于Giao先生在留期间分离困难，以及国际生殖隔离研究。我们将研究主题改为分离O,sativa/O.rufipogon杂交后代中的F1花粉不育位点5和SK36，这可以用重复基因的功能丧失模型来解释。为了阐明SK35/SK36等位基因的全部功能，焦先生对PG1_SK35-T65+、PG1c_SK36-niv+、PGld_SK36-niv+、PGle_SK36-n进行了研究。将iv+基因组构建体转化到SK35花粉半不育个体和SK36花粉半不育个体中，并在总共8个组合中研究T1或T2时SK35/SK36的基因型频率。很明显，两个副本都具有功能。 RT-qPCR对二细胞期和三细胞期表达量的分析显示，SK35半不育个体和SK36半不育个体的表达水平较T65降低了一半。我根据上述内容为原论文撰写了手稿，并在投稿前做好了准备，但由于转化实验的对照组得到的结果不明确而无法投稿。我们和焦老师达成共识，一旦获得对照组的实验数据，就立即提交论文。