Imaging analysis of stress signaling and spatio-temporal dynamics of MAPKKK activity

MAPKKK 活性的应激信号和时空动态的成像分析

• 批准号: 21770137
• 负责人: TOMIDA Taichiro
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21770137/
• 关键词: ストレス応答; キナーゼ; イメージング; ストレス; FRET

(1) Automated FRET analysis system was established by which intracellular MAPK activity from more than 1,000 cells can be imaged simultaneously in real-time. (2) By administrating MAPK activity FRET reporter to subcellular components, spatial distribution of stress-activated MAPK activity was determined. I found that ribotoxic stress, UV, hyperosmotic stress, and interleukin-1 induces p38 MAPK activation in cytoplasm. (3) Before this study, individual cellular response in mammalian cells has been not well understood because of the lack of the tools to determine individual cellular response with a good quantitativity. Using automated FRET system and MAPK activity indicator, I identified that ribotoxic stress response in individual cell was similar to average response of cell population at any doses applied.

（1）建立了自动化的FRET分析系统，通过该系统可以实时同时成像来自1,000多个细胞的细胞内MAPK活性。 （2）通过将MAPK活性FRET报告器管理到亚细胞组件，确定了应力激活的MAPK活性的空间分布。我发现核糖毒性应激，紫外线，高渗曲应激和白介素1会在细胞质中诱导p38 MAPK激活。 （3）在这项研究之前，由于缺乏用良好的定量性来确定个体细胞反应的工具，因此对哺乳动物细胞中的单个细胞反应尚未得到充分的了解。使用自动FRET系统和MAPK活性指标，我确定单个细胞中的核毒性应激反应与任何施加的剂量时细胞群的平均反应相似。

项目成果

Stimulus-specific distinctions in spatial and temporal dynamics of stress-activated protein kinase kinase kinases revealed by a fluorescence resonance energy transfer biosensor.

荧光共振能量转移生物传感器揭示了应激激活蛋白激酶激酶激酶在空间和时间动力学上的刺激特异性差异。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Molecular and Cellular Biology Vol.29、No.22
• 作者: Taichiro Tomida;Pauline O'Grady;Mutsuhiro Takekawa;Haruo Saito.
• 通讯作者: Haruo Saito.

Stimulus-Specific Distinctions in Spatial and Temporal Dynamics of Stress-Activated Protein Kinase Kinase Kinases Revealed by a Fluorescence Resonance Energy Transfer Biosensor

荧光共振能量转移生物传感器揭示了应激激活蛋白激酶的空间和时间动力学的刺激特异性差异

• 发表时间: 2009
• 期刊: Molecular and Cellular Biology 29
• 作者: Taichiro Tomida;Mutsuhiro Takekawa;Pauline O'Grady;Haruo Saito
• 通讯作者: Haruo Saito

線虫感覚神経のMAP キナーゼリン酸化シグナルのin vivoイメージング解析

线虫感觉神经元 MAP 激酶磷酸化信号的体内成像分析

• 发表时间: 2011
• 作者: 冨田太一郎;斎藤春雄
• 通讯作者: 斎藤春雄

線虫感覚神経のMAPキナーゼリン酸化シグナルのin vivoイメージング解析

线虫感觉神经元 MAP 激酶磷酸化信号的体内成像分析

• 发表时间: 2011
• 作者: 冨田太一郎;斎藤春雄
• 通讯作者: 斎藤春雄

SPATIO-TEMPORAL DYNAMICS OF STRESS-ACTIVATED MAP3K ACTIVITY REVEALED BY A NOVEL FRET BIOSENSOR

新型 FRET 生物传感器揭示压力激活 MAP3K 活动的时空动力学

• 发表时间: 2010
• 作者: Taichiro Tomida;Mutsuhiro Takekawa;Pauline O'Grady;Haruo Saito
• 通讯作者: Haruo Saito