上皮欠損後角膜の創傷治癒過程でのルミカンの役割の研究

Lumican在角膜上皮缺损后伤口愈合过程中的作用研究

基本信息

批准号：
13771038
负责人：
雑賀司珠也
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Wakayama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

角膜上皮欠損後の上皮細胞遊走過程でのケラタン硫酸プロテオグリカンのコア蛋白質であるルミカンの役割に関する研究と、関連する眼創傷治癒過程での様々な細胞の挙動に対するルミカンの影響を検討した。角膜上皮細胞の創傷治癒過程では、先端の上皮細胞は、上皮-間葉系移行に類似した挙動をとり、ビメンチンを一過性に発現することが以前に確認出来ていたが、さらに上皮-間葉系移行でのルミカンの役割を検討するために他の細胞も用いた。水晶体上皮は、他の細胞の混入なく、創傷治癒過程での上皮-間葉系移行を研究できることから、まず、創傷後の水晶体上皮細胞でのルミカン発現を蛋白質レベルで検討したところ、水晶体上皮細胞も角膜上皮細胞と同様に創傷治癒過程で一過性にルミカンを発現した。さらに、ルミカンノックアウトマウス(Lum)の水晶体外傷での上皮-間葉系移行を検討した結果、Lum-/-マウスで、Lum+/-マウスと比較して、優位に遅延した。このことを受けて、角膜上皮細胞の治癒過程での先端細胞のビメンチン発現を検討したが、角膜上皮細胞の遊走はルミカン欠損で遅延するものの、ビメンチン発現には優位な変化は観察されず、ルミカンの役割の面角膜上皮細胞と水晶体上皮細胞での差異が確認された。一方、角膜穿孔外傷後の治癒過程をLum-/-マウスで、Lum+/-マウスと比較したところ、高額顕微鏡レベルでは差異は検出されなかったが、透過電子顕微鏡レベルでは、創傷に伴う実質コラーゲン線維の乱れの正常化はLum-/-マウスで遅延していた。

我们研究了硫酸角质素蛋白聚糖的核心蛋白lumican在角膜上皮缺损后上皮细胞迁移过程中的作用，并检查了lumican对相关眼部伤口愈合过程中各种细胞行为的影响。在角膜上皮细胞的伤口愈合过程中，先前已证实顶端上皮细胞表现出类似于上皮间质转化的行为并瞬时表达波形蛋白；其他细胞也被用来检查lumican在叶谱系转化中的作用。由于晶状体上皮使我们能够研究伤口愈合过程中上皮到间质的转变，而不会受到其他细胞的污染，因此我们首先在蛋白质水平上研究了受伤后晶状体上皮细胞中lumican的表达，类似于角膜上皮细胞。在伤口愈合过程中，角膜上皮细胞也短暂表达lumican。此外，我们研究了 Lumican 基因敲除小鼠 (Lum) 晶状体创伤后的上皮-间质转化，发现与 Lum+/- 小鼠相比，Lum-/- 小鼠的上皮-间质转化显着延迟。基于此，我们研究了角膜上皮细胞愈合过程中尖端细胞中波形蛋白的表达情况，尽管在lumican缺陷中角膜上皮细胞的迁移被延迟，但未观察到波形蛋白表达在角膜中的作用差异。确认了上皮细胞和晶状体上皮细胞。另一方面，当比较Lum-/-小鼠和Lum+/-小鼠角膜穿孔创伤后的愈合过程时，在昂贵的显微镜下没有检测到差异，但在透射电子显微镜水平上，伴随伤口的实质胶原纤维被破坏。在 Lum-/- 小鼠中检测到干扰的正常化被延迟。