主鎖骨格にオキサゾール環を有するペプチドの翻訳合成と生理活性ペプチドの探索

主链骨架带有恶唑环的肽的翻译合成及生物活性肽的寻找

基本信息

批准号：
09J09272
负责人：
鳥飼浩平
金额：
$ 0.9万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

オキサゾール環を主鎖骨格に有する特殊ペプチドを,酵素を用いず翻訳合成する技術を確立するため環化前駆体の合成に着手した。オキサゾール前駆体としてアミノ酸のβ炭素原子上にジチオアセタールを有する化合物を設定し合成を試みたが満足のゆく収率で前駆体を得ることが出来なかった。そこで別の特殊主鎖骨格を有するペプチドライブラリーの構築を目指すことにした。放線菌の生産する天然物アンホテリシンB(AmB)は,真菌の膜に作用するため,耐性菌が出現しにくい優れた抗真菌剤である。発見から50年以上が経過した現在でも臨床薬として使用されているが,重篤な腎毒性を有するなど解決すべき問題点も抱えている。AmBは分子の片側にポリエン鎖,もう片側に多数のヒドロキシ基を有するため両親媒性を示すが,本研究者はこの分子が持つ物理化学的性質に興味を持ち,膜作動性もしくは膜透過性を有する両親媒性ペプチド薬剤の開発を目指すことにした。所属研究室で開発した万能アミノアシル化リボザイム(フレキシザイム)を用いてtRNAにシステインのファルネシル誘導体(ファルネシル末端にクロロアセチル基を有する)をチャージした。得られたアミノアシルtRNAを大腸菌再構築無細胞翻訳系(wPUREシステム)に加えて翻訳を行ったところ,翻訳合成後,鎖状ペプチドのクロロアセチル基と下流のシステイン残基間で自発的な環化が進行し,主鎖骨格に疎水性のファルネシル基を有する新規環状ペプチドを与えた。本結果はライブラリー構築へと応用可能な主鎖骨格改変型ペプチド,さらには両親媒性ペプチドの合成に成功した数少ない例であり,今後上述のペプチド合成技術をディスプレイ法等と組み合わせることで天然物に勝る新規生理活性ペプチド(例えば腎毒性を軽減した擬AmB)や,ペプチド創薬上最大の問題点である膜透過性の低さを克服したペプチド性薬剤探索への展開が期待できる。

建立了一种在主清洁骨架中具有恶唑环的特殊肽，以建立一种无需酶即可翻译和合成的技术。作为恶唑前体，设置了氨基酸β-碳原子上具有二尾斑的化合物，由于令人满意的产量，无法获得前体。因此，我们决定构建一个具有另一个特殊清洁骨架的消化图书馆。天然物体是接线细菌生产的酒店-sin B（AMB），是一种极好的抗真菌剂，可作用于真菌膜上，不产生抗性细菌。即使经过50多年的发现，它仍然被用作临床药物，但有问题要解决，例如严重的肾脏毒性。 AMB显示了分子一侧的多烯链，一侧许多羟基，但是该研究人员对此分子感兴趣，并且对该分子的物理和化学性质感兴趣，并且我们决定开发膜的可操作性或渗透性。父母面向肽药物他使用在实验室中开发的通用氨基溶质核酶（Flexi sizyme），为半胱氨酸的Farnesil衍生物（在Farnesil的尽头）充电。除了大肠杆菌重建（WPURE系统）外，获得的氨基酰基tRNA被翻译时，它是链形肽的氯乙酰基在翻译后自发的环境。环肽在主清洁骨架上具有疏水基团的疏水基团。该结果是成功合成主要清洁框架的示例之一，可以应用于图书馆的构造，甚至可以将父母置于库的肽中。，一种降低肾脏毒性的伪AMB和一种克服低膜通透性的肽药物搜索，这是肽药物发现中最大的问题。