ES細胞、iPS細胞を用いた血管内皮細胞分化機構の解析

利用ES细胞和iPS细胞分析血管内皮细胞分化机制

基本信息

批准号：
09J06481
负责人：
山水康平
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J06481/
关键词：
ES細胞 iPS細胞分化誘導血管内皮細胞 VEGF cAMP 動脈血管前駆細胞

项目摘要

本研究では、申請者らが構築した胚性幹(embryonic stem : ES)細胞からの内皮細胞分化誘導システムを用いて、血管分化多様化機構、特に新たに見出したcAMPの作用機構を解明を試みた。血管内皮細胞分化におけるcAMPシグナルの役割活性化型PKA (CA-PKA)発現をFlk1陽性細胞において発現させたところ、内皮細胞分化や3次元的血管構造形成が著しく促進された。CA-PKA発現により内皮細胞分化が誘導され、Flk1-VEGF165-NRP1タンパク複合体形成も認められた。cAMP/PKAシグナルは血管前駆細胞のVEGFに対する感受性を向上させることで、内皮細胞分化を促進することを明らかにした(Blood,114:3707-3716,2009)。動脈内皮細胞の運命決定機構におけるcAMPシグナルの役割Flk1陽性細胞へのVEGF及びcAMPの添加により認められた動脈内皮細胞誘導は、□-cateninとNotch Notchを同時に活性化することによりcAMP非存在下においても再現された。RBP-J-Notch-□-cateninが動脈内皮細胞特異的にタンパク複合体を形成していた。cAMPシグナル下流の動脈内皮細胞誘導機構を明らかにした(J Cell Biol,189:325-338,2010)。(3)オピオイドの内皮細胞分化及び血管走行制御における新しい意義従来神経機能制御に関与しているKappaオピオイド受容体(KOR)がcAMPに抑制的に作用することにより内皮分化及び血管形成を抑制していることを明らかにし、オピオイドの新しい神経外作用、を明らかにすることに成功した(Blood,in press)。このように、cAMPを中心とした新しい血管分化多様化機構を次々と明らかにすることに成功し、当初の期待以上の研究の進展を認めている。

在这项研究中，我们试图阐明血管分化多样化的机制，尤其是新发现的cAMP的作用机理，使用诱导申请人构建的胚胎茎（ES）细胞的内皮细胞分化的系统。当活化的PKA（CA-PKA）表达在FLK1阳性细胞，内皮细胞分化和3维血管结构形成中表达时，CAMP信号在血管内皮细胞分化中的作用显着促进。 CA-PKA表达诱导的内皮细胞分化，也观察到FLK1-VEGF165-NRP1蛋白复合物的形成。 cAMP/PKA信号已被证明可以通过增加血管祖细胞对VEGF的敏感性来促进内皮细胞的分化（血液，114：3707-3716，2009）。 cAMP信号在动脉内皮细胞的命运确定机制中的作用也可以通过同时激活□-Catenin和Notch Notch Notch的cAMC来诱导通过将VEGF和CAMP添加到FLK1阳性细胞中观察到的动脉内皮细胞。 RBP-J-NOTCH-□ - 蛋白酶在动脉内皮细胞中形成的蛋白质复合物。揭示了cAMP信号下游的动脉内皮细胞的诱导机制（J Cell Biol，189：325-338，2010）。 (3) New significance in the control of endothelial cell differentiation and vascular travel of opioids We have discovered that Kappa opioid receptor (KOR), which has previously been involved in the regulation of neural function, inhibits endothelial differentiation and angiogenesis by acting repressively on cAMP, and have successfully revealed a new extraneurological effect of opioids (Blood, in press).通过这种方式，我们成功地阐明了血管分化多样化（主要是cAMP）的新机制，并认识到与最初的期望相比，研究的进一步进步。