肝細胞スフェロイド3次元形成のためのマイクロ空間プラットフォームの開発

开发用于肝细胞球体 3D 形成的微空间平台

基本信息

批准号：
09J05340
负责人：
太田裕貴
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度までで肝組織形成プラットフォームの基本構築が達成されていたため,本年度はプラットフォームとしての完成と,そのプラットフォームの応用を行った.具体的には(1)申請書の予定に沿って,前年度までに行った基本プラットフォームの基本構成をもとに長期培養のための還流システムの改善を行った.(2)同様に,プラットフォームの高処理を実現するために,チャンバのアレイ化(並列化)を行った.(3)昨年度までは単一細胞によるスフェロイドの形成方法に関して検討してきた.本年度は更に生体を模擬したスフェロイドである異種複数細胞からなるヘテロスフェロイドの形成を行った.その結果,(1)長期培養のために,従来の還流システムを改善し更に二つのコンポーネントを自作し,培養日数を1週間まで延長した。(2)チャンバのアレイ化を行い,チャンバを15個連結できるようにし,従来に比べ15倍の処理能力を可能にした.(3)異種細胞の接着は困難であったため,コラーゲンゲルを新たに使用することでヘテロスフェロイド形成を可能にした.そのヘテロスフェロイド形成の評価を行い,その結果,サイズ制御が可能であること及び高速(約2分)でスフェロイドが形成できることが判明した.これらの結果から,交付申請書の目的である肝細胞スフェロイド3次元形成のためのマイクロ空間プラットフォームを提案し,具現化した.さらに本プラットフォーム及びバイオマテリアルを利用した新たなヘテロスフェロイド形成手法を提案し,従来数日かかるヘテロスフェロイドの形成を約2分で可能にする高速ヘテロスフェロイド形成を実現した.本研究は、バイオマテリアルとマイクロ流体を利用した新たなプラットフォームを提案するものであり社会に対して十分な貢献を行うことが出来た.

由于去年已经实现了肝脏组织形成平台的基本建设，今年我们完成了该平台并进行了应用。具体来说，（1）按照申请表中的时间表，完成了肝脏的基本建设在前一年的组织形成平台的基础上，我们改进了长期培养的回流系统。 (2)同样，为了实现平台的高通量，我们改进了长期培养的回流系统。长期文化。 (3) 直到去年，我们一直在研究使用单细胞形成球体的方法。今年，我们进一步研究了异质球体的形成，异质球体是模拟活体生物体的球体。结果如下：（1）对于长期培养，我们改进了传统的回流系统，并自制了两个附加组件，将培养时间延长至一周。 (2) 腔室排列成阵列，可连接 15 个腔室，处理能力比以前提高了 15 倍。 (3) 由于不同类型的细胞粘附困难，我们开发了一种新的胶原蛋白凝胶。异质球体我们评估了异质球体的形成，发现可以控制大小，并且可以高速（约2分钟）形成球状体。从这些结果中，我们确认了目标肝细胞我们提出并实现了一种用于三维球体形成的微空间平台。我们还提出了一种利用该平台和生物材料形成异质球体的新方法。本研究提出了一种利用生物材料和微流控的新平台，并取得了充分的成果。对社会的贡献。