転写因子Pit-1による下垂体ホルモンの組織特異的発現制御機構の解明

转录因子 Pit-1 阐明垂体激素的组织特异性表达控制机制

• 批准号: 09J05209
• 负责人: 谷内 秀輔
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J05209/
• 关键词: Pit-1; 成長ホルモン; プロラクチン; 甲状腺刺激ホルモン; 精巣; 下垂体; 転写因子; in situ RT-PCR; 網膜; ニワトリ; マウス

Pit-1wの転写活性化能を明らかにするため,マウスPit-1w発現ベクターを作製し,成長ホルモン(GH),プロラクチン(PRL),甲状腺刺激ホルモンβサブユニット(TSHβ)遺伝子のプロモーターの転写活性に与える影響をHEK293細胞においてレポーター解析により調べた。その結果,Pit-1wはPRLのプロモーターの転写活性を有意に増加させたが,その増加率はPit-1αと比較して低かった。一方,Pit-1wはGHおよびTSHβのプロモーターの転写活性を増加させなかった。これらの結果は,ニワトリPit-1w発現ベクターを用いたレポーター解析の結果と一致しており,Pit-1wの機能は鳥類と哺乳類の間で共通であると考えられた。精巣におけるPit-1wの生理的機能を明らかにするため,1,2,3,4,5,6,8,10週齢のICR系統マウスの精巣においてGH,PRL,TSHβのmRNA発現とPit-1wのmRNAおよびタンパク発現との相関を調べた。GHおよびTSHβの発現はPit-1wの発現パターンとの相関が見られなかった。PRLの発現は1,2週齢では低く,3週齢以降に急上昇するというPit-1wと同様の発現パターンを示した。Pit-1mRNA発現細胞を同定するために,8週齢のICR系統マウスの精巣においてin situ hybridization法を行ったところ,一部の精原細胞および全ての精母細胞,精子細胞において陽性シグナルが検出され,特に精母細胞で強い陽性シグナルが得られた。精母細胞および精子細胞は2週齢から3週齢の間に増加することが知られており,その時期はPit-1w mRNAの発現が急上昇する時期と一致する。以上のことから,マウスの精巣においてPit-1wはPRLの発現を制御するとともに精母細胞への分化以降の精子形成に関与する可能性が示唆された。

为了阐明PIT-1W的转录激活能力，制备了小鼠PIT-1W表达载体，并通过报告细胞在HEK293细胞中研究了HEK293细胞在HEK293细胞中研究了生长激素（GH），催乳素（PRL）和甲状腺刺激激素β亚基（TSHβ）基因对转录活性的影响。结果表明，PIT-1W显着增加了PRL启动子的转录活性，但增加速率低于PIT-1α。另一方面，PIT-1W并没有增加GH和TSHβ启动子的转录活性。这些结果与使用Chicken Pit-1W表达载体的记者分析结果一致，而PIT-1W的功能被认为在鸟类和哺乳动物之间很常见。为了阐明睾丸中PIT-1W的生理功能，在1、2、3、3、4、5、6、8、8、10周龄的ICR菌株小鼠的睾丸中研究了GH，PRL和TSHβ与MRNA的mRNA表达与PIT-1W的蛋白质表达之间的相关性。 GH和TSHβ的表达与PIT-1W的表达模式无关。 PRL的表达在1或2周龄时较低，并且显示出与PIT-1W相似的表达模式，该模式在3周后急剧上升。为了鉴定表达PIT-1 mRNA的细胞，在8周大的ICR菌株小鼠的睾丸中进行原位杂交，并在某些精子细胞中检测到阳性信号，所有精子细胞和精子细胞中所有的精子细胞，尤其是在精子细胞中获得尤其强的阳性信号。已知精子细胞和精子细胞在2至3周龄之间增加，与PIT-1W mRNA表达的时期相吻合。这些结果表明，PIT-1W调节小鼠睾丸中PRL的表达，并且在分化为精子细胞后可能参与精子发生。

项目成果

脊椎動物における転写因子Pit-1のアイソフォームの分子進化

脊椎动物转录因子 Pit-1 亚型的分子进化

• 发表时间: 2009
• 作者: 永川桂大;新倉謙一;大竹範子;鈴木忠樹;松尾保孝;澤洋文;居城邦治;Lina Nordquist;Akihiro Kamikawa;上川昭博;Mabrouk A.Abd Eldaim;Daniela Tomie Furuya;Akihiro Kamikawa;鈴木千春;谷内秀輔;谷内秀輔;谷内秀輔;谷内秀輔
• 通讯作者: 谷内秀輔

転写因子Pit-1の下垂体外組織における発現と下垂体ホルモンの発現制御

垂体外组织转录因子Pit-1的表达及垂体激素表达的调控

• 发表时间: 2011
• 期刊: 岡山実験動物研究会報
• 作者: 永川桂大;新倉謙一;大竹範子;鈴木忠樹;松尾保孝;澤洋文;居城邦治;Lina Nordquist;Akihiro Kamikawa;上川昭博;Mabrouk A.Abd Eldaim;Daniela Tomie Furuya;Akihiro Kamikawa;鈴木千春;谷内秀輔
• 通讯作者: 谷内秀輔

マウス精巣をモデルとしたPit-1wの機能解析

以小鼠睾丸为模型的 Pit-1w 功能分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 永川桂大;新倉謙一;大竹範子;鈴木忠樹;松尾保孝;澤洋文;居城邦治;Lina Nordquist;Akihiro Kamikawa;上川昭博;Mabrouk A.Abd Eldaim;Daniela Tomie Furuya;Akihiro Kamikawa;鈴木千春;谷内秀輔;谷内秀輔
• 通讯作者: 谷内秀輔

転写因子Pit-1の選択的プロモーター由来のアイソフォームPit-1Wの機能と分子進化に関する解析

转录因子Pit-1选择性启动子衍生同种型Pit-1W的功能和分子进化分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 永川桂大;新倉謙一;大竹範子;鈴木忠樹;松尾保孝;澤洋文;居城邦治;Lina Nordquist;Akihiro Kamikawa;上川昭博;Mabrouk A.Abd Eldaim;Daniela Tomie Furuya;Akihiro Kamikawa;鈴木千春;谷内秀輔;谷内秀輔;谷内秀輔
• 通讯作者: 谷内秀輔