両生類のアクアポリン水チャネルの系統進化とそれらの水適応における生理学的機能解析

两栖类水通道蛋白水通道系统发育及其水适应生理功能分析

• 批准号: 09J03448
• 负责人: 尾串 雄次
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Shizuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J03448/
• 关键词: アクアポリン(AQP); Pelvic Patch領域; Stopped flow spectrophotometry; アクアポリン; 抗利尿ホルモン; 下腹部皮膚; アフリカツメガエル; 翻訳阻害; β受容体; トランスロケーション; 水適応

無尾両生類の下腹部皮膚には下腹部皮膚型アクアポリン(AQP)が発現し、アルギニンバソトシン(AVT)の調節下で下腹部皮膚から水を吸収する。1)半水棲カエルの下腹部皮膚型アクアポリン(AQP)クローニング半水棲のアカガエル(Rana japonica)は、下腹部皮膚型AQPとしてAQP-rj3が知られているが、これとは異なる下腹部皮膚型AQP、AQP-rj3Nを新規にクローニングし、発現分布と機能を解析した。その結果、このAQP-rj3Nは大腿部皮膚に主として発現し、AVTによる調節を受けることを明らかとした。AQP-rj3とAQP-rj3NはどちらもAVT刺激によりトランスロケーションすることで、下腹部皮膚からの水吸収を促進する。2)各種カエル下腹部皮膚におけるPelvic patch領域の比較陸上棲のヒキガエルや樹上棲のアマガエルでは、下腹部皮膚から大腿部皮膚にかけて広くPelvic patch領域が分布するが、一部の半水棲のカエルではAQPの発現が大腿部のみでしか見られず、Pelvic patch領域の範囲がカエルの種や生息環境によって異なることを明らかとした。3)各種AQP分子の水透過能の比較AQPの機能解析には、ツメガエル(Xenopus laevis)の卵細胞を用いたSwelling assayが広く使われている。しかし、カエルのAQPの中には、ツメガエルの卵細胞でタンパク質発現するものの、細胞膜に輸送されず、水透過能が測定できないものがいくつか見られた。そのため、カエルAQPの水透過能を比較することが困難であったため、ツメガエル卵ではなく、酵母菌を用いた実験系を用いて水透過能解析を行なった。酵母から膜画分を精製し、膜小胞の膨張を測定するStopped flow spectrophotometry法を確立し、同方法を用いてAQP水透過能を測定した。

下腹皮肤类型水通道蛋白（AQP）在拮抗剂的下腹部皮肤中表达，并在精氨酸血管素（AVT）的控制下吸收了下腹皮肤的水。 1）在半高速青蛙（Rana Japonica）中，下腹部皮肤类型水通道蛋白（AQP）的克隆已称为AQP-RJ3是下腹部皮肤型AQP，但下腹部腹部皮肤类型AQP-RJ3N，AQP-RJ3N，AQP-RJ3N，AQP-RJ3N，新近串联以分析表达分布和功能。结果，揭示了AQP-RJ3N主要在股骨皮肤中表达，并受AVT的调节。 AQP-RJ3和AQP-RJ3N均被AVT刺激易位，以促进下腹部皮肤的吸水。 2）比较生活在陆地上的各种青蛙的下腹部皮肤中的骨盆斑块区域，骨盆斑块区域从下腹皮肤广泛分布到大腿皮肤，但在某些半量表的青蛙中，在某些半毒性青蛙中，AQP在大小的范围内呈现出来，并且在大小范围内呈现了pervic的范围。栖息地。 3）比较各种AQP分子的水渗透性以分析功能性AQP，使用Xenopus laevis卵细胞的肿胀测定法。但是，发现青蛙中的某些AQP在异爪蟾卵细胞中表达蛋白质，但未转运到细胞膜，无法测量水的渗透性。因此，很难比较青蛙AQP的水渗透性，因此使用酵母菌而不是爪蟾卵进行了使用实验系统进行水渗透性分析。从酵母中纯化膜馏分，并建立了停止的流量分光光度法方法以测量膜囊泡的肿胀，并使用相同的方法测量了AQP水的渗透性。

项目成果

半陸上棲無尾両生類のpelvic patchにおける皮膚型アクアポリンの局在

半陆生无尾两栖动物骨盆斑块中皮肤水通道蛋白的定位

• 发表时间: 2009
• 作者: 尾串雄次;都築亜純;鈴木雅一;田中滋康
• 通讯作者: 田中滋康

半水棲無尾両生類の大腿部に発現する新規水チャネルアクアポリンの同定と機能解析

半水生无尾两栖动物大腿中表达的新型水通道水通道蛋白的鉴定和功能分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 尾串雄次;岡田令子;松田学;鈴木雅一;田中滋康
• 通讯作者: 田中滋康

ニホンアマガエル下垂体における哺乳類アクアポリンに相同なAQP-h3BLの発現

与哺乳动物水通道蛋白同源的 AQP-h3BL 在日本树蛙垂体中的表达

• 发表时间: 2009
• 作者: 尾串雄次;中倉敬;赤羽根弦;佐藤恵;持田弘;鈴木雅一;田中滋康
• 通讯作者: 田中滋康

無尾両生類の水環境への適応と下腹部皮膚に発現する水チャネルアクアポリンの多様性

无尾两栖动物对水生环境的适应和下腹部皮肤表达的水通道水通道蛋白的多样性

• 发表时间: 2010
• 作者: 峯岸ゆり子;後藤典子;Tsuyoshi Kajitani;Tomohiro Nozaki;Tomohiro Nozaki;Kei Hayashi;野崎友大;野崎友大;Tomohiro Nozaki;野崎友大;渡邉肇;小田重人;加藤泰彦;加藤泰彦;加藤泰彦;加藤泰彦;加藤泰彦;加藤泰彦;Ogushi Y;Ogushi Y;加藤泰彦;Ogushi Y;加藤泰彦;加藤泰彦;尾串雄次
• 通讯作者: 尾串雄次

Correlation between aquaporin and water permeability in response to vasotocin, hydrin, and adrenergic effectors in the ventral pelvic skin of the tree frog, Hyla japonica.

水通道蛋白与水渗透性之间的相关性，以响应树蛙腹侧骨盆皮肤中的催产素、Hydrin 和肾上腺素能效应物。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Journal of Experimental Biology 213
• 作者: 峯岸ゆり子;後藤典子;Tsuyoshi Kajitani;Tomohiro Nozaki;Tomohiro Nozaki;Kei Hayashi;野崎友大;野崎友大;Tomohiro Nozaki;野崎友大;渡邉肇;小田重人;加藤泰彦;加藤泰彦;加藤泰彦;加藤泰彦;加藤泰彦;加藤泰彦;Ogushi Y;Ogushi Y;加藤泰彦;Ogushi Y
• 通讯作者: Ogushi Y