脳発生におけるsbno1の生化学的および機能的解析

sbno1 在大脑发育中的生化和功能分析

• 批准号: 09J02935
• 负责人: 高野 愛
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J02935/
• 关键词: RNAi; 神経分化; エレクトロポレーション; Notch; 初代培養

本研究課題では、脳の形態形成および神経発生に関与する遺伝子Sbnolの分子メカニズムを解明することを目的としている。El4.5のマウス胎児脳初代培養系を用いて、マウス大脳皮質にエレクトロボレーション法にようってSbno1のRNAiを導入し遺伝子阻害を行った結果、神経分化が抑制された。さらにSbno1がNotchシグナルに関与するHes1,Hes5、Dll-1遺伝子の発現を制御することを明らかにした。すなわち、Sbnolを遺伝子阻害するとNotchのリガンドであるD11-1の発現がdownregulateされること、一方でNotchのエフェクターであるHes5およびHes1がupregulateされることが明らかになった。また、Notchのインヒビター(DAPT)を用いた実験あるいは、caNotchを用いた実験結果により、Sbno1がNotchシグナルの下流で機能することを明らかにしたが、これは、Sbno1とSu(H)が結合するとという結果と一致する。以上の所見から、Sbno1はネガティブレギュレーターとしてNotchシグナルを抑制することでニューロン分化を促進する因子であることが示唆された。神経幹細胞マーカーMusashiの発現を確認したところ、sbno1をKDした細胞で強い発現が確認されました。したがって、Sbno1ノックダウンした細胞は神経幹細胞の状態を保持していることも示唆された。

该研究主题旨在阐明SBNOL的分子机制，SBNOL是涉及脑形态发生和神经发生的基因。使用带有El4.5的小鼠胎儿脑的原发性培养，使用电骨方法将SBNO1引入小鼠大脑皮层中并抑制基因，从而导致神经分化的抑制。此外，揭示了SBNO1调节Notch信号中涉及的HES1，HES5和DLL-1基因的表达。换句话说，据表明，抑制SBNOL基因会导致Notch配体D11-1的下调，而Notch效应子Hes5和Hes1的上调。此外，使用NotCH抑制剂（DAPT）和划线的实验表明，Notch信号下游的SBNO1功能与SBNO1和SU（H）结合的结果一致。这些发现表明，SBNO1是通过抑制Notch信号作为负调节剂来促进神经元分化的因素。当确认神经干细胞标志物麝香的表达时，在具有SBNO1的KD的细胞中证实了强表达。因此，还建议将SBNO1撞倒的细胞保留了神经干细胞状态。

项目成果

Expression of Strawberry Notch Family Genes During Zebrafish Embryogenesis

• DOI: 10.1002/dvdy.22287
• 发表时间: 2010-06-01
• 期刊: DEVELOPMENTAL DYNAMICS
• 影响因子: 2.5
• 作者: Takano, Ai;Zochi, Riyo;Katsuyama, Yu
• 通讯作者: Katsuyama, Yu