分子プローブを用いた脂質ラフトにおけるタンパク質-リン脂質相互作用の構造基盤解明

使用分子探针阐明脂筏中蛋白质-磷脂相互作用的结构基础

基本信息

批准号：
09F09715
负责人：
村田道雄
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

脂質ラフトは、スフィンゴミエリン(SM)およびコレステロールを主体とする細胞膜ドメインである。また、脂質ラフトは、特異的に集積したタンパク質を介して細胞間シグナル伝達に重要な役割を果たしていると考えられている。そこで本研究では、有機合成化学的手法によりラフトにおける脂質間相互作用を分子レベルで解明することを目指した。具体的にまず本研究では、従来の脂質蛍光プローブでは困難であった膜中における相互作用を精密に解析できる新たなプローブ分子の設計と開発を目的とした。前年度までにSMの主骨格および親水性部分の構築法を確立したので、本年度は親水性部分(コリン頭部)への蛍光標識基の導入を種々検討した。その結果、アジド基を有する蛍光標識基と、プロパルギル基を有するSM誘導体とをClick Chemistryを用いて連結することで、ニトロベンジル基およびダンシル基を有するSM誘導体の合成に成功した。今後はFRET測定や蛍光顕微鏡による解析への利用を計画している。またさらに本年度において、ラフトにおける脂質間相互作用に対するSMの構造的要因を明らかにするため、2種類のSM誘導体の合成を行った。すなわち、まずSMのE-二重結合を三重結合に変換した誘導体を、ほぼ同様のスキームを利用することで合成した。また、3位ヒドロキシル基の立体が反転したトレオ誘導体を、亜鉛アセチリドの立体選択的付加、続くRed-Al還元によるE-オレフィンの構築を鍵反応として合成することに成功した。

脂质筏是一个细胞膜结构域，主要基于旋转垃圾（SM）和胆固醇。另外，脂质筏被认为在通过特定积累的蛋白质传输细胞间信号中起着重要作用。因此，在这项研究中，我们旨在通过有机合成化学方法在分子水平上阐明筏中的脂质相互作用。具体而言，在这项研究中，我们旨在设计和开发一种可以准确分析膜相互作用的新探针分子，这在常规脂质荧光探针中很难。到上一年，建立了SM的主要骨骼和亲水性部分的施工方法，因此今年我们检查了向亲水性（胆碱头）引入荧光标志。结果，使用单击化学连接了具有氢化物组和带有pepalgill组的SM衍生物的荧光符号，该化学成功地合成了具有硝基苯基和Dancingil组的SM衍生物。将来，我们计划使用荧光显微镜使用FRET测量和分析。此外，在今年，合成了两种类型的SM衍生物，以阐明SM的结构因子与筏中脂质的互连的结构因子。也就是说，通过使用几乎相同的方案合成了将SM转换为三键的E双键转换为三键的衍生物。此外，三维羟基被倒，并成功地通过三维乙酰乙酰基锌乙酰基和随后的红色还原来合成e-烯夫蛋白的构建。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Synthesis of Novel Fluorescent-Labelled Sphingomyelin

新型荧光标记鞘磷脂的合成

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sarah Goretta;Christelle Tasciotti;Simon Mathieu;Mario Smet;Wouter Maes;Yoann M.Chabre;Wim Dehaen;Richard Giasson;Jean-Manuel Raimundo;Claude R.Henry;Clemens Barth;Marc Gingras;Goretta Sarah;Goretta Sarah
通讯作者：
Goretta Sarah

新規蛍光標識化スフィンゴミエリン誘導体の合成とその応用

新型荧光标记鞘磷脂衍生物的合成及其应用

DOI：
发表时间：
2011
期刊：
影响因子：
0
作者：
Sarah Goretta;Christelle Tasciotti;Simon Mathieu;Mario Smet;Wouter Maes;Yoann M.Chabre;Wim Dehaen;Richard Giasson;Jean-Manuel Raimundo;Claude R.Henry;Clemens Barth;Marc Gingras;Goretta Sarah
通讯作者：
Goretta Sarah